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TCA具有致癌性、致畸性,是我国最普遍的有机污染物之一,严重危害人体健康和生态环境,因此对TCA污染治理的研究十分必要。采用顶空-GC-FID法测定了某TCA污染场地的6个地下水样品中的TCA、1,1-二氯乙烷(1,1-dichloroethane,DCA)和氯乙烷(chloroethane,CA)的浓度。所有样品中均测得TCA的生物降解产物DCA和(或)CA,由此推测此6个采样点的地下水中可能存在TCA的生物降解。采用特异性荧光实时定量PCR分别测定6个样品中Dehalobacter的丰度,结果表明,6个样品中Dehalobacter的丰度差异较大,其中以样品W6中Dehalobacter的丰度最高。以细菌16S rRNA基因通用引物27f和Dehalobacter属特异性引物647r为上下游引物,对总菌DNA进行扩增,利用克隆文库技术将所得扩增产物构建了6个样品的Dehalobacter特异性克隆文库,所得序列与GenBank中的代表性的16S rRNA基因参考序列构建了系统发育树。6个克隆文库共获得41条序列,经序列比对发现,与它们最相似的已知分类地位的16S rRNA基因序列全部属于Dehalobacter属。按照99%的相似性为标准,将所有序列划分成7个可操作性分类单元(OTU),其中OTU1(24 sequences)和OTU2(8 sequences)是最优势的两个OTU,共占全部41条序列的78.0%。OTU1和OTU2的序列与已知能降解TCA的Dehalobacter sp.str.TCA1的16S rRNA基因序列相似性达98%;将文库中的3个OTU(OTU3、OTU5、OTU6)在GenBank中进行16S rRNA同源性比对,最高仅为95~96%,表明该场地可能存在一些新的Dehalobacter细菌类型。本研究表明该TCA污染场地地下水中存在Dehalobacter属细菌,其多样性较丰富,可能与TCA生物降解有关。对4个TCA污染的地下水水样W1、W2、W4、W6在实验室条件下的降解做了探索。将原始地下水样品W1、W2、W4、W6转入血清瓶中,加入维生素B12和酵母提取物作为生长因子,在厌氧、25℃、110 r/min震荡、避光条件下培养九周。培养分为两组,一组加入外源混合电子供体“MEAL”(EA组),另一组不加任何外源电子供体(NE组)。运用顶空-GC-FID法测量培养九周后各个样品中氯代烷烃的降解率,发现在上述培养条件下,EA组中各个样品的氯代烷烃的降解率均高于相对应的NE组样品,可见外源电子供体的添加可加速各样品中氯代烷烃的降解。Dehalobacter相对定量PCR分析发现,培养九周后,各个样品中Dehalobacter含量均下降至原始样本的1/20及以下。PCR-DGGE结果显示各个样品在两种培养条件下培养三周、六周、九周后,原始样品中的优势条带均被弱化,EA组和NE组均出现了新的优势条带,培养前后,菌群结构变化较大。生长因子和外源电子供体的加入、温度等培养条件的变化可能是造成此变化的原因。