甘蓝单花蕾小孢子培养技术研究及未抽薹结球DH株腋芽再生

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探索甘蓝小孢子培养获得高效出胚的新思路,通过筛选培养皿规格、培养基中6-BA浓度、游离小孢子离心速度和时间、单花蕾热激时间等因素,比较甘蓝单花蕾小孢子培养效果,初步建立甘蓝单花蕾小孢子培养技术体系;前年培养小孢子再生DH株今年未能抽薹开花不能实现生殖生长完成种子繁殖,为了防止优良DH株资源丢失,开展了DH株腋芽再生植株方法的探索,从DH株腋芽最佳消毒方式、培养基和添加激素浓度、腋芽部位等因素进行了研究,主要得出以下结论:1.甘蓝单花蕾在直径Φ30 mm培养皿中添加3mL培养基最有利于高出胚率的小孢子培养;供试甘蓝杂种一代品种F17-A和F17-B在4.7-5.1mm的花蕾长度范围都可以进行单花蕾培养,平均出胚率分别为22.1胚/蕾和23.0胚/蕾。2.甘蓝杂种一代品种F17-B花蕾,在NLN-14+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基进行单花蕾小孢子培养,相比其它培养基出胚率最高,为24.5胚/蕾。3.在单花蕾小孢子培养离心和热激反应过程中,离心速度为2000rpm,离心时间5min,热激时间为48h,平均出胚率相比较高,为25.0胚/蕾。4.利用未抽薹结球DH株腋芽再生植株,75%酒精消毒20s腋芽组织培养污染率最低为6.6%,植株再生率最高为86.7%;选用MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L固体培养基进行腋芽再生,再生率最高90.0%。5.DH株不同部位腋芽再生植株比较,叶球中部腋芽褐化率最低,再生植株率最高为83.3%;莲座叶芽再生植株率最低为70.0%;再生植株移栽存活率最高为叶球外部腋芽,高达87.0%,最低为叶球内部腋芽,为72.7%。结果得出,DH株腋芽再生植株最适部位为叶球外部和中部腋芽。6.DH株叶球不同紧实度中腋芽再生植株比较,紧实度越大,再生株数最少;紧实度越小,再生率越高,越有利于腋芽生长。
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