反式脂肪酸对大鼠神经系统损伤及其机制研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangzhaodsg
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]反式脂肪酸(Trans fatty acids,TFA)是一类化学结构中含有反式构型非共轭双键的不饱和脂肪酸的总称。食物油脂的氢化加工是TFA的主要来源。TFA具有增加食品松脆口感、易于长期保存的特点,被广泛应用于包装和煎炸食品中。研究证实,长期食用含有TFA的食物会造成多种疾病的发生与发展。随着对TFA研究的深入,流行病学调查发现,长期摄入TFA可造成学习记忆功能减退,但其相应的损伤机制尚不清楚。本实验以Wistar大鼠作为研究对象,经口给予TFA,通过检测大鼠脑组织中抗氧化酶、ATP酶、乙酰胆碱酯酶、一氧化氮合酶的活性以及脑组织中必需元素含量,观察海马形态学改变,检测海马细胞凋亡情况,研究和探讨TFA对大鼠神经系统损伤以及作用机制。[方法]1.动物分组与灌胃选择SPF级雄性Wistar大鼠(200±20g)48只,于笼中分开饲养,自由饮水和进食。大鼠适应性喂养1周后,按体重随机分为4组,即对照组(玉米油组)和TFA低、中、高剂量组,各组分别按照0 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、150 mg/kg的剂量经口给予TFA-玉米油溶液,每天1次,连续12周。2.动物处理灌胃阶段结束后,每组2只大鼠,4%多聚甲醛心脏灌注,取出脑组织固定于4%多聚甲醛,制作石蜡切片。其余大鼠禁食24 h,称重,断头处死并收集血液,分离血清。立即于冰袋上取出脑组织称重,分离海马和皮层。血清、海马和大脑皮层均存于-80℃,用于后续检测。3.大鼠一般生长发育状况的观察每日观察并记录大鼠活动和精神状况,记录饮水和进食情况。每周称量一次体重,记录数值。脑组织称重,计算脑系数。4.大鼠大脑皮层和血清中抗氧化系统指标的检测取出大脑皮层称重,按质量:体积=1:9加入生理盐水,制备10%匀浆液;血清用生理盐水稀释到合适浓度。按试剂盒步骤测定超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,以及丙二醛(MDA)含量。5.大鼠大脑皮层ATPase活力的检测取出大脑皮层称重,按质量:体积=1:9加入生理盐水,制备10%匀浆液。按照试剂盒步骤测定大脑皮层中Na+K+-ATPase、Mg2+-ATPase和Ca2+-ATPase的活力。6.大鼠大脑皮层乙酰胆碱酯酶(AChE)和一氧化氮合酶(NOS)活性的检测取出大脑皮层称重,按质量:体积=1:9加入生理盐水,制备10%匀浆液。按照试剂盒步骤测定AChE和NOS活性。7.大鼠脑组织中必需元素的测定取0.2 g脑组织,微波消解,火焰原子吸收光谱法测吸光度,计算各元素含量。8.大鼠海马形态学观察取出固定的脑组织,脱蜡水合,制成石蜡切片,进行HE染色,切片置于镜下观察。9.大鼠海马细胞凋亡情况的检测将制作的石蜡切片,脱蜡后,按照TUNEL试剂盒说明进行染色,观察细胞凋亡情况。应用RT-PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达水平。[结果]1.大鼠一般生长发育状况实验期间,对照组大鼠精神和活动状态良好,饮食和饮水状况正常,大鼠皮毛顺滑有光泽;而TFA组大鼠随着灌胃时间增长,出现饮食不良、精神不佳,皮毛蓬松、暗淡无光泽。随着染毒时间延长,TFA组特别是高剂量组大鼠体重增长明显变缓,终体重也明显低于对照组(P<0.05)。比较各组大鼠脑系数发现,TFA高剂量组大鼠脑系数显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.TFA对大鼠大脑皮层抗氧化系统的影响结果显示,TFA低、中、高剂量组SOD的活性明显低于对照组,而MDA的含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TFA中、高剂量组GSH-Px的活性明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.TFA对大鼠血清抗氧化系统的影响结果显示,TFA中、高剂量组血清中SOD和GSH-Px的活性均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TFA低、中、高剂量组血清中MDA的含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.TFA对大鼠大脑皮层中ATPase活力的影响结果显示,TFA低、中、高剂量组Na+K+-ATPase、Ca2+-ATPase的活力均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TFA中、高剂量组Mg2+-ATPase活性明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.TFA对大鼠大脑皮层中AChE和NOS活性的影响结果显示,TFA低、中、高剂量组AChE的活性均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TFA中、高剂量组NOS的活性明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。6.TFA对大鼠脑组织中必需元素水平的影响结果显示,TFA低、中、高剂量组Mg和Fe元素含量均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TFA中、高剂量组Zn元素含量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。而Ca、Cu元素的含量在各组之间比较无明显差异(P>0.05)。7.海马结构形态学观察切片镜下观察发现,对照组大鼠海马神经元细胞数目较多、排列紧密。TFA组大鼠海马神经细胞数量和层数均有不同程度的减少,神经细胞排列疏松、紊乱,部分神经细胞出现核固缩、胞浆深染。8.TFA对大鼠海马细胞凋亡情况的影响对照组和TFA摄入组大鼠海马中均未见到明显的凋亡细胞;此外,与对照组相比,TFA组大鼠海马组织中凋亡相关因子Bcl-2,BaxmRNA表达也未见显著改变(P>0.05)。[结论]TFA摄入引起脑组织中抗氧化系统损伤、降低ATP酶活性、影响AChE和NOS活性、引起机体必需元素水平失衡,并且可引起大鼠海马形态学改变,从而导致神经系统损伤。然而,在本实验条件下,未观察到TFA对大鼠海马组织细胞凋亡的影响。
其他文献
在不同气氛下制备了YF3掺杂钛酸钡材料,并对其电阻的正温度系数特性进行了研究。借助于XRD、SEM、XRF、阻温特性测试仪和阻抗分析仪,研究了不同处理气氛对YF3掺杂肽到钡材料结构和性能的影响。
采动裂隙带卸压瓦斯抽采是工作面瓦斯防治的主要方法,介绍了采动裂隙动态演化规律的研究现状,分析了卸压瓦斯抽采原理。根据瓦斯抽采直接通道的不同,总结提出采动裂隙带瓦斯
新时代开启了中国"强起来"的新征程,赋予了一批示范企业"建设世界一流"的新使命,提出了财务管理转型发展的新要求。加快构建世界一流企业的财务管理体系,是贯彻落实十九大"培
小学英语绘本阅读教学效果并不是一两个课时就能够看到的,对小学生而言,从对英语绘本的不了解到充满好奇,从不喜欢英语阅读到饶有兴趣地进行学习,再到对绘本故事的编演,他们所需要经历的往往是系统化的学习。借助于英语教师的合理引导与启发,学生从英语绘本中吸取知识,感受绘本阅读的乐趣,这也是小学英语绘本阅读教学的魅力所在。  一、小学英语绘本阅读的重要意义  我们知道,小学英语绘本的主要特征在于图画生动形象、
目的中西医结合治疗心血管疾病并焦虑症的临床疗效。方法通过对我院2018年1月~2020年1月收治的近百例心血管疾病患者中选择48例收集分析相关情况后展开研究,随机分为实验组和
<正>创客社团作为创客教育的衍生产物,是目前中小学创客教育实践的主要形式。创客教育作为实现STEAM教育的一种重要方式,强调培养学生的个性化科技创新素养,所以大部分学校重
文章采用中国家庭收入调查(CHIP)数据,根据准实验研究设计原理将初次外出的新农民工按其拥有的社会关系与信息网络差异分为7个不同情境的处理组与对照组,运用熵均衡处理方法
预制轻混凝土约束墙板结构是一种适用于我国村镇低、多层住宅的新型结构体系。它由轻混凝土预制空心墙板与外围构造柱、圈梁等约束构件组成承重墙体,采用预制叠合板作为承重
在现行教材中,寓言故事这种文体的所占比例越来越大,涵盖了低、中、高三个年段。寓言故事,以其生动的故事情节、幽默的语言、简单的道理深深地吸引着孩子,不管是国外的《伊索
在当今网络技术高速发展的时代,翻转课堂作为一种新兴的教学模式被大家所关注。针对城市地下空间工程专业传统实践教学当中存在的问题,将翻转课堂引入实践教学当中,以学生为