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本文拟构建pDisplay-bmp-2表达载体和携带信号肽序列的bmp-2重组腺病毒Ad-Track-sp-bmp-2。Adeasy-1是缺陷性腺病毒的骨架质粒，通过其穿梭质粒Ad-track-CMV将外源性基因与病毒骨架整合，从而包装出具有广泛感染性的重组腺病毒。本研究拟构建bmp-2重组腺病毒骨架，期望以重组bmp-2腺病毒感染骨髓基质细胞，鉴定腺病毒的感染能力和目的基因的表达情况，为深入研究做前期的准备。
研究方法：
1.携带信号肽序列的bmp-2真核表达载体的构建根据bmp-2序列设计特异性引物，以质粒pcDNA3-bmp-2为模板，克隆出bmp-2基因片断；通过酶切连接构建重组pDisplay-bmp-2质粒；酶切及测序鉴定重组质粒。
2.sp-bmp-2病毒骨架的构建根据信号肽序列(signalpeptide)和bmp-2序列设计特异性的上下游引物，以重组pDisplay-bmp-2质粒为模板，克隆出sp-bmp-2基因片断；将sp-bmp-2基因片断重组入腺病毒穿梭质粒；酶切及测序重组穿梭质粒；将穿梭质粒与Adeasy-1质粒PmeⅠ线性化后在大肠杆菌BJ5183中同源重组；酶切鉴定病毒骨架。
研究结果：
1.DNA序列分析显示重组pDisplay-bmp-2质粒构建正确。
2.DNA序列分析显示穿梭质粒构建正确；酶切鉴定证明病毒骨架携带有目的基因。
研究结论：
1.成功构建了携带信号肽序列的bmp-2真核表达载体。
2.成功构建了bmp-2重组腺病毒骨架质粒。