罗格列酮对人胃癌细胞侵袭转移的影响及其机制

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目的:研究PPARγ激动剂罗格列酮(ROS)对人胃癌SGC7901、SGC7901/VCR细胞的侵袭能力的影响,并初步探讨其可能机制。方法:Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭实验检测罗格列酮对SGC7901、SGC7901/VCR细胞侵袭能力的影响。罗格列酮(40μmol/L)作用24小时后,采用RT-PCR方法检测SGC7901、SGC7901/VCR细胞中uPA、uPAR、MMP-9、TIMP-3 mRNA表达的变化,Western-blot检测SGC7901、SGC7901/VCR细胞中p-ERK1/2、Fra-1、uPA、uPAR、MMP-9、TIMP-3蛋白表达的变化。免疫组织化学方法检测罗格列酮对人胃癌SGC7901/VCR细胞裸鼠移植瘤中MMP-9、TIMP-3、uPA、uPAR蛋白表达的影响。结果:1.体外侵袭实验显示40μmol/L的ROS处理24h后SGC7901、SGC7901/VCR细胞侵袭能力明显降低(P<0.05);2.RT-PCR结果显示40μmol/L ROS处理24h后SGC7901、SGC7901/VCR细胞uPA、MMP-9 mRNA表达下调(P<0.05),TIMP-3 mRNA表达上调(P<0.05),uPAR mRNA表达无明显变化(P>0.05);3.Western-blot结果显示40μmol/L的ROS处理24h后SGC7901、SGC7901/VCR细胞p-ERK1/2、Fra-1、uPA、MMP-9蛋白表达下调(P<0.05),TIMP-3蛋白表达上调(P<0.05),uPAR蛋白表达无明显变化(P>0.05)。4.免疫组化实验结果显示:A组、B组MMP-9蛋白表达最强, C组、D组、E组、F组与A组和B组比较差异有显著性(P<0.05),E组表达最少,F组与C组、D组比较差异无显著性(P>0.05);uPA在A、B、F组表达最强,C组、D组与A组、B组、F组比较差异有显著性(P<0.05),E组表达最少; uPAR表达各组比较差异无显著性(P>0.05);A组、B组、F组TIMP-3蛋白表达最少,C组、D组与A组、B组和F组比较差异有显著性(P<0.05),E组表达最强。结论:1.罗格列酮在体外能显著抑制SGC7901、SGC7901/VCR细胞迁移侵袭能力;2.罗格列酮抑制胃癌侵袭可能的机制是通过ERK/Fra-1通路在人胃癌SGC7901、SGC7901/VCR细胞中及体内SGC7901/VCR细胞移植瘤中下调MMP-9、uPA的表达以及上调TIMP-3的表达。
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