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蛇毒中含有三类与血液凝集和细胞粘附有关的蛋白质,即GPIb/IX结合蛋白,出血毒和去整合素。去整合素是49-84个氨基酸、富含半胱氨酸的小分子量多肽,由-S-S-桥形成的环中含有RGD结构(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸),能够有效抑制血小板聚集,去整合素是金属蛋白酶P-Ⅱ的前体蛋白的水解的产物。蛇毒中的去整合素分为四组:①短链去整合素,通常由49-51氨基酸组成,含有8个半胱氨酸;②中链去整合素,由70个氨基酸组成,含有12个半胱氨酸;③长链去整合素,由84个氨基酸组成,含有14个半胱氨酸;④由二个亚基组成的双链去整合素。本实验以长白山乌苏里蝮蛇毒(Gloydius ussuriensis Venom)为材料,利用CM-Sepharose FF阳离子交换层析除去蛇毒中大部分阳离子杂蛋白,再通过DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析,采用0-1mol/LNaCl连续梯度洗脱除去蛇毒中大部分阴离子杂蛋白,通过Sephadex G-100和Sephadex G-75两次凝胶过滤层析进行纯化,成功地从长白山乌苏里蝮蛇毒中分离得到一种新的蛋白单体组分。经还原和非还原SDS-聚丙烯酰胺凝胶碱性不连续垂直电泳进行纯度鉴定和蛋白分子量测定,结果显示均为单一条带,分子量在7.4kD左右的ussurin。对纯化的ussurin进行血小板凝集抑制试验、抗肿瘤活性测定和安全性试验,结果显示ussurin具有较强的血小板凝集抑制活性,提示该多肽为一种蛇毒去整合素。Ussurin对人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela均具有较强的抑制能力,其IC50分别为6.1μg/ml、6.1μg/ml及6.9μg/ml。小鼠尾静脉注射ussurin的LD50为1481mg/kg,其95%可信区间为1272-1784mg/kg。大鼠腹腔注射ussurin的LD50为1383mg/kg,其95%可信区间为1292-1503mg/kg。按毒性分级标准属于低、中等毒,为临床推荐用量(2-4mg/kg)的461-494倍。ussurin无免疫原性,无溶血性,未来临床应用较为安全。