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背景:阿尔茨海默症(Alzheimer’s Disease, AD),是痴呆最常见的原因,在临床上称为原发性老年痴呆症,是一种常见的起病隐匿的进行性发展的中枢神经系统退行性疾病,患者可因继发感染和并发症而死亡。AD发病机制复杂,病因不明,随着人类社会进入老龄化的步伐加快,我国65岁以上老年人口数目逐年增加,有研究显示,我国痴呆患者人数已超过800万,到2040年,将超过2600万。痴呆致残率高,会给家庭和社会带来沉重的负担。因此,预防和治疗阿尔茨海默病(AD)具有积极的社会性意义,中医中药在AD防治中具有独特的地位和广阔的前景。需明确阿尔兹海默症的现状,深入阐明发病机制,发现新的药物靶点,寻找治疗阿尔兹海默症的有效药物。原儿茶酸(Protocatechuic acid, PCA)是存在于许多蔬菜和水果中的一种天然酚酸类化合物,并且是很多中药的活性成分,例如益智仁、丹参、芙蓉等。而益智仁是我国著名的“四大南药”之一,药理学研究报告发现其具有抗癌,保护心血管等作用,对神经细胞具有抗衰老、抗氧化、降低兴奋性毒性等作用。研究发现,益智仁的主要成分原儿茶酸具有良好的神经保护作用。关于原儿茶酸的药理作用已有大量报道,原儿茶酸具有抗炎、抗氧化、抑制肿瘤的作用;原儿茶酸对缺血、缺氧神经元细胞具有一定的保护作用;原儿茶酸可显著抑制MPP+、H202或鱼藤酮诱导的PC12细胞调亡和氧化应激,具有良好的抗氧化和神经保护作用目的:本实验研究以Aβ1-42寡聚体诱导PC12细胞Aβ沉积的AD细胞模型,研究原儿茶酸对Aβ1-42寡聚体诱导PC12细胞毒性的保护作用及机制,为更好明确原儿茶酸神经保护作用及作用机制,进一步开发益智仁及其有效单体原儿茶酸而提供实验依据。方法:首先采用免疫荧光法鉴定Aβ1-42纤维寡聚体,将Aβ1-42作用于PC12细胞,并于不同时间点(0、3、6、9、12、24 h)观察PC12细胞的形态,运用MTT比色法检测细胞存活率以确定造模条件。并且通过MTT比色法检测原儿茶酸对PC12细胞的毒性作用。然后采用预报护的给药方式,检测不同浓度的原儿茶酸对PC12细胞的干预作用。通过使用Western-blot的方法来检测与自噬相关标记蛋白Beclinl的表达水平,用以验证原儿茶酸对PC12细胞Aβ沉积的AD细胞模型的保护作用机制。结果:1.在显微镜下可观察到当12h和24 h时,A β1-42淀粉样白色团块聚集基本稳定,无明显差异,MTT比色法检测PC12细胞的损伤率均达40%,由此可以确定12 h和24 h均可做为AD的造模条件。2.当原儿茶酸在200 μmol/L浓度时作用24 h的条件下,细胞活力有所上升。同时,Western-blot结果显示,原儿茶酸增加了Beclinl的表达水平。结论:原儿茶酸可明显降低Aβ1-42对PC12细胞毒性,其作用机制可能与增加自噬水平有关,对于其抗AD作用有更深层次的研究价值。