高效液相色谱法因具有分析速度快、分离效率高、实现了自动化等特点而被广泛应用于药物分析、生化分析及环境分析等领域。其超强的分离能力使之成为诸多领域积极采纳的分析手段之一,并成为分析化学中发展最快、应用广泛的研究领域之一。然而由于样品中待测组分含量低或其本身性质以及高效液相色谱检测器的限制,并非所有化合物都可以直接用高效液相色谱进行分析,而荧光衍生法能够使这些化合物转变成荧光衍生物,提高检测的灵敏度,从而进行荧光检测。因此新型衍生试剂的开发及在高效液相色谱中的应用研究一直是色谱领域中最为活跃的研究方向之一。本文主要研究了两种荧光试剂的设计合成并对其进行结构表征与光谱分析,优化了试剂与样品的衍生化条件,建立了相应的高效液相色谱分离方法,并用于实际样品的分离分析。本论文的主要研究内容如下：第一章简述了高效液相色谱和高液相色谱质谱联用的基本理论及应用进展。介绍了化学衍生化和荧光衍生,分析总结了荧光衍生试剂的研究进展。第二章在实验室已合成的咪唑类和吖啶酮类荧光衍生试剂的基础上进行修饰,合成了两种新型荧光标记试剂：1-[2-(对甲苯磺酸酯)乙基]-2-[(4-二甲氨基)苯基]-菲[9,10-d]咪唑(PPMB)和2-(9-吖啶酮)-乙酰肼(?)(AACE-NHNH2),对其进行了结构表征和光谱分析。第三章利用新合成的荧光标记试剂PPMB分别对15种混合脂肪酸及20种饱和脂肪酸进行衍生,通过对衍生化反应条件和色谱条件的优化,建立了有效的色谱分离及质谱鉴定方法,并将其用于几种药材中脂肪酸的分离分析。结果表明,建立的方法具有线性范围宽、重现性好、操作简单等特性,适用于实际样品的分析测定。第四章利用荧光标记试剂PPMB对9种胆汁酸进行柱前衍生,通过对衍生化反应条件和色谱条件的优化,建立了有效的色谱分离方法,并将其用于人血清中胆汁酸的测定。结果表明所建立的方法具有很大的可行性。第五章利用新合成的荧光标记试剂AACE-NHNH2对10种脂肪醛进行柱前衍生,通过对衍生化反应条件和色谱条件的优化,建立了有效的色谱分离及质谱鉴定方法,并将其用于人血清中脂肪醛的分离与测定。结果表明所建立的方法具有很大的可行性。