富硒纳豆芽孢杆菌的制备及对秀丽隐杆线虫的作用研究

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硒元素在地壳中较为常见,对维持人体正常的生理代谢和健康水尤为重要。但是,土壤中的硒缺乏是一个全球性的难题。人工合成有机硒的困难程度较大,费用较高。因此,生物法制备有机硒成为热门研究。纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)是一种可食用益生菌,对人体无病原性,它可以将亚硒酸钠转化为有机硒。本研究对纳豆芽孢杆菌富硒的发酵条件进行了优化,并探究了富硒纳豆芽孢杆菌对线虫衰老相关指标、应激抵抗力及相关抗氧化酶活的影响,在高效低成本的硒源研究中具有一定的参考价值,为进一步探究富硒纳豆芽孢杆菌在人类健康化衰老中的作用提供数据支持。实验结果如下:1.通过单因素实验确定添加亚硒酸钠的同时接入菌株、所添加的亚硒酸钠质量浓度为10μg/ml时是最适培养参数。经过响应面实验确定各培养条件对有机硒转化率影响程度的顺序为:接种量>培养基初始pH值>培养时间,最适培养参数为:添加亚硒酸钠的同时接入菌株、添加10μg/ml亚硒酸钠、培养基初始pH值为7.5、培养时间10 h、接种量为3.5%,最佳转化率达到91.21%。2.处理物作用5 d时,两种硒源对秀丽隐杆线虫运动能力的影响不显著(P>0.05),经过10 d的处理后,40μg/ml亚硒酸钠组线虫的运动能力显著降低(P<0.05)而富硒纳豆芽孢杆菌组线虫运动能力随着浓度的升高呈上升趋势,且18.26μg/ml浓度组上升显著(P<0.05)。纳豆芽孢杆菌组与亚硒酸钠组秀丽隐杆线虫的产卵量与对照组相比无显著性差异(P>0.05),硒浓度为9.13μg/ml及18.26μg/ml的富硒纳豆芽孢杆菌组线虫的产卵量均有显著的提高(P<0.05,P<0.01)。与对照组相比,添加40μg/ml亚硒酸钠实验组线虫平均寿命缩短15.05%(P<0.05),最长寿命缩短20.27%(P<0.01),9.13μg/ml及18.26μg/ml浓度组线虫平均寿命分别延长19.97%及27.91%(P<0.01)。3.经过不同含硒量的亚硒酸钠及富硒纳豆芽孢杆菌处理后的线虫在双氧水的刺激下平均寿命为103.57±9.56 min、76.67±5.26 min、83.55±7.43 min及115±10 min、124±7.21 min、140.95±12.15 min,较对照组分别提高了111.84%、56.82%、70.89%及135.22%、153.63%、188.30%(P<0.01)。37℃环境下18.26μg/ml组线虫平均寿命较对照组延长了29.44%(P<0.01)。给线虫喂食18.26μg/ml富硒纳豆芽孢杆菌3d后,SOD与CAT酶活分别提高135.67%及36.26%(P<0.01)。总而言之,富硒纳豆芽孢杆菌对线虫因衰老产生的神经及肌肉损伤有一定的保护作用,且能够提高线虫的产卵量。培养基中亚硒酸钠含量较低时对线虫寿命无显著性影响,40μg/ml亚硒酸钠的长期处理对线虫有毒性作用,而富硒纳豆芽孢杆菌具有延长线虫寿命的作用且高浓度组无毒性作用,还能够提高线虫氧化应激、热应激抵抗力及线虫体内SOD及CAT酶活性,从而提高线虫抗氧化系统防御能力。表明富硒纳豆芽孢杆菌具有显著的提高抗氧化能力的作用。
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