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研究哇巴因对人类癌细胞的抑制增殖和诱导凋亡的作用；探讨哇巴因对人类癌细胞膜上Na+/K+-ATPase的α1亚基和α3亚基的影响,并采用RNAi法干扰人类癌细胞的Na+/K+-ATPase aj和α3亚基,进一步验证强心苷作用于肿瘤细胞的靶点。四唑盐比色法(MTT法)研究了哇巴因对人类肾癌细胞株OS-RC-2的增殖抑制效果,并绘制生长曲线；通过AO/EB染色、电泳法和Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞检测OS-RC-2细胞的凋亡现象,通过碘化丙啶(PI)染色流式细胞分析OS-RC-2细胞的周期变化；通过激光共聚焦显微镜观察OS-RC-2细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)的变化；用Western blot检测哇巴因作用于OS-RC-2细胞前后细胞中Bax与Bcl-2蛋白表达的变化。MTT法测定NCI-H446及Na+/K+-ATPase α1、α3干扰后的人类小细胞肺癌株NCI-H446对哇巴因敏感性的变化；用免疫组化检测经哇巴因处理的Na+/K+-ATPaseα1l亚基和α1亚基蛋白的表达情况；采用RNAi法对Na+/K+-ATPase a3亚基高表达株NCI-H446细胞进行干扰；用Real-time PCR法检测NCI-H446细胞、Na+/K+-ATPaseα1、α3干扰后的NCI-H446细胞中的mRNA表达量；用免疫组化检测NCI-H446细胞、Na+/K+-ATPase α1、α3干扰后的NCI-H446细胞中的蛋白表达量。浓度为20nmol·L-1的哇巴因就能抑制OS-RC-2细胞的增殖,其48h的IC50值为38.40nmol·L-1; AO/EB荧光染色法、DNA跑电泳法及Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞法检测均显示哇巴因能明显诱导OS-RC-2细胞的凋亡,PI染色流式细胞分析显示哇巴因处理后的OS-RC-2的细胞周期阻滞为S期；通过激光共聚焦显微镜观察,细胞内活性氧和钙离子浓度均随药物浓度的增加而升高；Western blot检测显示哇巴因处理后的OS-RC-2细胞内Bcl-2蛋白的表达量减少,而Bax蛋白的表达量增加。不同浓度的哇巴因分别作用于Na+/K+-ATPase a3isoform高表达株NCI-H446细胞48h后,Na+/K+-ATPase α1亚基与α3亚基的表达无明显差异；通过对NCI-H446的Na+/K+-ATPase α1、α3的干扰,NCI-H446细胞对哇巴因的敏感性与Na+/K+-ATPaseα3的表达水平成正相关。哇巴因能有效抑制肿瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,并进一步确定哇巴因抗肿瘤的靶点可能在Na+/K+-ATPase的α3亚基上。