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目的:研究器官联合切取中的不同胰腺获取方法是否对于胰岛细胞的活性有影响。探讨脑死亡自愿捐赠器官的供者多器官联合切取时用于人类胰岛细胞移植的胰腺获取方法中,采用高渗枸橼酸盐嘌呤溶液经原位灌注后胰岛细胞的活性和冷缺血时间的关系。研究人类胰岛细胞移植中供受者的HLA配型和胰岛细胞存活的关系。以猪的胰岛移植探讨胰岛细胞移植后穿刺出血及肝内感染的发生。 方法:采用高渗枸橼酸盐嘌呤溶液经过供者腹主动脉进行原位灌注后,进行肝脏、胰腺、肾脏联合切取及各器官的单独切取,在相同的冷缺血时间内,采用胶原酶P消化胰腺,分离并纯化胰岛细胞,进行胰岛细胞活性染色,然后对比不同的切取方法是否对于胰岛细胞的活性率有影响。高渗枸橼酸盐嘌呤溶液1,500-2,000ml经主动脉原位灌注后,进行肾-胰腺-十二肠-脾联合切取,切取后分离肾与胰腺-十二肠-脾,采用胶原酶P消化胰腺,分离并纯化胰岛细胞,进行胰岛细胞活性染色。并将胰岛细胞培养进行胰岛素释放试验。将胰岛细胞进行固定,切片后进行透射电镜观察胰岛细胞超微结构。将已知HLA配型的胰岛细胞分别加入到HLA匹配组和错配组的血液当中去,观察混合培养1h后的血液当中血小板、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞变化以及培养1h和24h后观察活性胰岛细胞的数量变化。采用高渗枸橼酸盐嘌呤溶液经过猪的腹主动脉进行原位灌注后,进行胰腺切取,采用胶原酶P消化胰腺,分离并纯化胰岛细胞,然后对猪胃左静脉穿刺后进行肝内胰岛细胞移植,对受者猪进行饲养一周后,进行肝脏的病理学检查。