热休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs)是一组具有重要生理功能、结构上高度保守的蛋白质分子，普遍存在于各种生物细胞中。热休克反应(Heat shock reaction,HSR)是指在组织细胞受到缺氧、病毒感染、氧自由基损伤及肿瘤等各种应激因素导致损伤时，为适应周围微环境而做出的一种保护性反应，该反应以上调表达HSPs为特点。根据分子量及其氨基酸序列的同源性，可将HSPs分为HSP100、HSP90、HSP70、HSP60和低分子量HSP等几个家族。其中研究最为深入的是HSP70，正常细胞中HSP70的表达受细胞周期调控，发挥其“分子伴侣”的功能。而在肿瘤组织中HSP70在受到突变或异常蛋白质的刺激下呈现持续的高表达，在许多恶性肿瘤(如乳腺癌、肠腺癌、肺癌等)中，HSP70的高表达与肿瘤的恶性程度及患者的无瘤生存期相关。HSP70在肿瘤组织中的异常表达一方面在于肿瘤细胞的大量增殖需要其作为分子伴侣来调节稳定此过程，另一方面HSP70的高表达可以协助肿瘤细胞逃避免疫监视。其中最重要的机制之一便是与癌基因的表达产物或者肿瘤相关蛋白相互结合而参与肿瘤的发生发展。本实验对80例肝癌及癌旁肝硬化组织进行了HSP70的免疫组化染色，结果显示HSP70在肝癌及癌旁肝硬化组织中均呈高表达。HSP70参与了肝癌的发生发展。 HSP70与突变型p53蛋白相互结合形成p53-HSP70复合物在口腔癌及卵巢癌组织中已得到证实，并且该复合物可能参与了某些细胞的恶变并可作为 第四军医大学硕士学位论文判断肿瘤患者预后不良的一项指标。二者在肝癌组织中的关系未见报道。我们实验室在以往的研究中通过免疫组织化学、原位杂交及荧光抗体双标记结合激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）等方法发现在肝癌组织中不仅有HSP70及突变型p53的高表达，且二者的表达有一定的相关性，p53阳性者一定伴有HSP70的核阳性，二者共定位表达于细胞核中。 本实验对临床收集到的肝癌组织标本制备石蜡切片，进行免疫组织化学染色，从中筛选出5例HSP70与p53均为阳性的组织，然后用两种不同的组织匀浆法分别提取组织总蛋白和核蛋白，用 western blot和 ELISA初步检测，进而利用免疫共沉淀法提取目的蛋白，最后以 western blot检测之。结果显示：无论总蛋白还是核蛋白经抗HSP70 mAb沉淀的样品中均存在p53蛋白，以抗p53 InAb沉淀的样品中也存在HSP70蛋白，提示肝癌组织中 HSP70与p53是以复合物的形式存在的，此复合物可能是HSP70调控p53功能的物质基础。 本研究一方面从分子水平证实了p53爿SP70复合物可能是肝癌发生发展中HSP70调节p53功能的一种重要方式Z另一方面，也提示肝癌中可能存在基于p53－HSP70复合物的肿瘤主动兔疫机制，因此该复合物可以作为抗肝癌的特异性疫苗用子肝癌的特异性免疫基因治疗。可以预见，利用HSP70能与肿瘤来源的p53结合形成p53－HSP70复合物这一特性，通过从肿瘤组织中直接提取或者融合蛋白表达、体外重建等方法来制备特异性肿瘤疫苗，从而作为肝癌的免疫基因治疗有其现实可行性。