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炭疽是由炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)引起的一种人兽共患病,主要传染源为食草类动物,人类通过接触患炭疽的动物及其畜产品,或空气、土壤中的炭疽芽胞而被感染。炭疽毒素包括水肿毒素(edema toxin, ET)和致死毒素(lethal toxin, LT),是炭疽芽胞杆菌产生的主要毒力因子。ET由保护性抗原(protective antigen, PA)和水肿因子(edema factor, EF)组成,LT由PA和致死因子(lethal factor, LF)组成。PA是毒素复合物的关键蛋白质,并且是主要的免疫原性物质。因此,由PA所导致的免疫反应是在患病动物或人类感染过程中将产生重要的保护作用,对血清中抗-PAIgG的浓度或者滴度的检测,可以作为判断机体是否感染炭疽或者接种过疫苗的指标之一,以往的许多炭疽血清学检测方法基本上是建立在这一基础之上的。本研究从炭疽芽胞杆菌的核糖体结合位点(Ribosomal binding site, RBS)对基因翻译起始、调控作用方面验证了公布的炭疽毒素蛋白质基因序列起止位置的可靠性。通过对5株炭疽芽胞杆菌基因组16S rRNA基因序列进行比较,确定了炭疽芽胞杆菌RBS序列为：GCACCUUCC。通过对以Ames ancestor菌株pXO1质粒的研究显示：在已标注的203个编码序列(coding sequence, CDS)中,在124个起始密码子之前存在着RBS序列,所占比例为61.08%,RBS序列与起始密码子的间隔碱基长度近似于以7为均数的正态分布。通过对该质粒的全序列进行高频RBS搜索,将所得到的ORF与已标注CDS进行比较,符合或部分符合率为63.89%,所有的炭疽毒素蛋白质和相关调控基因的起始密码子之前均存在着RBS序列,可以作为判定毒素基因克隆表达的准确起止位置的重要标识。本研究应用标准化毒素中和试验(toxin neutralization assay,TNA)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)对我国炭疽临床病例及健康对照血清进行了检测。TNA检测临床病例血清131份,健康对照血清100份,其中45份临床病例血清为阳性,其它均为阴性,临床病例血清阳性率为34.35%,不同发病时间段间的血清阳性率无差异。ELISA检测临床病例血清83份,健康对照血清100份,其中76份临床病例血清阳性,阳性率为91.57%,健康对照血清7份阳性,阳性率为7%。通过比较两种试验方法检测结果的异同点,发现：TNA阳性血清的ELISA结果也均为阳性,ELISA阴性血清的TNA结果也均为阴性,而部分TNA阴性血清的ELISA结果却为阳性；TNA阳性血清的ELISA阳性滴度比TNA阴性血清的高；ELISA和TNA双阳性的45份血清,ED50值与抗体滴度相关(R2=0.461),说明血清中的抗-PA IgG浓度与炭疽毒素中和活性相关。本研究的结果为建立我国炭疽毒素蛋白质的表达系统提供了参考依据,并首次获得了我国炭疽临床病例产生保护性中和抗体的实际数据,提供了TNA与ELISA方法共同诊断炭疽病例的依据,根据研究结果,提出了对我国炭疽病例进行血清学诊断的5项技术指标,为确定我国炭疽监测的重点地区以及高危人群的免疫保护提供了科学依据。