雌激素治疗脊髓损伤的实验研究

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目的:①观察雌激素对脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后大鼠后肢运动功能的影响;观察雌激素对SCI后大鼠脊髓神经细胞形态的影响;②检测生长相关蛋白-43(Growth-Associated Protein 43, GAP-43)在脊髓中的表达,初步探讨雌激素促进SCI修复的机制。方法:采用同批不同窝别144只8周龄SD雄性大鼠随机分为A、B、C、D四组,即正常对照组、假手术组、生理盐水干预组、雌激素治疗组。A组不做任何处理,B组只打开T13~L5椎板,暴露脊髓而不损伤脊髓,C、D两组运用自制Allen’s打击器制作SCI模型,C组分别在术后30分钟、1天、2天经腹腔注入生理盐水,与D组等量;D组分别在术后30分钟、1天、2天经腹腔注入4mg/kg的雌激素;实验各组均于术前前、术后3天、术后1周、术后2周、术后3周及术后4周分别行BBB评分和Rivlin斜板试验,以观察脊髓神经功能恢复情况;于术后1天、术后3天、术后1周、术后2周、术后3周、术后4周处死大鼠,完整取出T13-L5节段脊髓进行HE染色观脊髓察病理变化,免疫组织化学染色观察GAP-43的表达情况。结果:①脊髓神经功能评价:A、B两组在术后各个时间点相比较无差异;D组BBB评分和Rivlin斜板试验角度在术后1周、术后2周、术后3周、术后4周明显优于C组,差异统计学意义(P<0.01)。②HE染色:A组和B组的神经元结构正常,细胞膜完整,尼氏体清晰属正常脊髓组织,C组脊髓组织恢复较差,在脊髓神经元变性、坏死方面明显较D组重,神经元数量在不同的时相点也明显低于D组。③免疫组织化学染色:A、B两组未见明显表达GAP-43阳性细胞,C组和D组从SCI后第1天起GAP-43表达开始增加,术后1周时阳性细胞数达到高峰,此后慢慢下降,而C组下降较快;在术后1天、术后3天、术后1周、术后2周、术后3周多个时相点D组较C组表达GAP-43阳性细胞数多且着色深,差异统计学意义(P<0.01)。结论:①外源性雌激素在SCI后具有一定的神经保护作用,能够促进大鼠后肢运动功能的恢复。②外源性雌激素能够减轻SCI后神经元的变性、坏死;具有促进脊髓神经元的修复和再生的作用,其机制可能与增加脊髓GAP-43的表达有关。
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