【摘 要】
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目的评价活性氧（ROS）/核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路在地氟烷预处理减轻脂多糖（LPS）诱导的大鼠脑急性炎症中的作用。方法健康雄性清洁级的SD大鼠168只,随机分为4组（n=42）:对照组（C组）、脑急性炎症组（L组）、地氟烷预处理+脑急性炎症组（DL组）和N-乙酰半胱氨酸+地氟烷预处理+脑急性炎症组（N+DL组）。L组、DL组和N+DL组采用尾静脉注射LPS（1 mg/kg）制备大鼠
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目的评价活性氧（ROS）/核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路在地氟烷预处理减轻脂多糖（LPS）诱导的大鼠脑急性炎症中的作用。方法健康雄性清洁级的SD大鼠168只,随机分为4组（n=42）:对照组（C组）、脑急性炎症组（L组）、地氟烷预处理+脑急性炎症组（DL组）和N-乙酰半胱氨酸+地氟烷预处理+脑急性炎症组（N+DL组）。L组、DL组和N+DL组采用尾静脉注射LPS（1 mg/kg）制备大鼠脑急性炎症模型,C组尾静脉注射同等剂量的生理盐水;DL组吸入8.2%地氟烷1 h,每天1次,连续5 d进行地氟烷预处理,第5次吸入停止后24 h时注射LPS;N-DL组每次吸入地氟烷前30 min,腹腔注射ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸（150 mg/kg）,其余操作同DL组。于LPS注射前18 h时,取大鼠海马组织,采用ELISA法测定ROS含量及抗氧化酶的活性,采用West-ern Blot法测定Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）和Nrf2表达水平,采用免疫荧光双标染色测定脑皮质和海马C A1区神经胶质细胞的Nrf2表达水平;于LPS注射后6、12和24 h时采用M orris水迷宫实验测定大鼠的逃避潜伏期、原平台象限探索时间和穿越原平台次数,采用Western blot法测定海马NOD样受体蛋白3（NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）表达水平,采用ELIS A法测定海马IL-18和IL-1β含量;于LPS注射后24 h时采用尼氏染色和免疫荧光染色分别计数脑皮质和海马CA1区正常神经元及神经胶质细胞活化的数量。结果与C组比较,L组LPS注射前海马ROS含量,抗氧化酶SOD、CAT和G SH-Px活性,Keap1表达及神经胶质细胞中的Nrf2表达水平差异无统计学意义（P>0.05）,LPS注射后各时点逃避潜伏期延长,在原平台象限探索的时间缩短且穿越原平台的次数减少,海马NLRP3、ASC和Caspase-1表达上调,I L-18和IL-1β含量升高,脑皮质和海马CA1区正常神经元数量减少,神经胶质细胞活化数量增多（P<0.05）;与L组比较,DL组LPS注射前海马ROS含量,抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px活性增加,神经胶质细胞Nrf2表达水平升高,Keap1表达水平下降（P<0.05）,LPS注射后各时点逃避潜伏期缩短,在原平台象限探索的时间延长且穿越原平台的次数增多,海马NLRP3、ASC和Caspase-1表达下调,IL-18和IL-1β含量降低,脑皮质和海马CA1区正常神经元数量增多,神经胶质细胞活化数量减少（P<0.05）;与DL组比较,N+DL组LPS注射前海马ROS含量,SOD、CAT和GSH-Px活性减少,神经胶质细胞Nrf2表达水平下降,Keap1表达水平升高（P<0.05）,LPS注射后各时点逃避潜伏期延长,原平台象限探索时间缩短且穿越原平台次数减少,海马N LRP3、ASC和Caspase-1表达上调,IL-18和IL-1β含量上升,脑皮质和海马C A1区正常神经元数量减少,神经胶质细胞活化数量提高（P<0.05）。结论地氟烷预处理可能通过ROS/Nrf2信号通路增强抗氧化应激,抑制NLRP3炎症小体生成,从而减轻LPS诱导的大鼠脑急性炎症。
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