库拉索芦荟凝胶全成分特征指纹图谱研究

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芦荟是集医疗、美容、食用等功能于一体的经济作物,我国芦荟产业经过20多年的发展,目前已成为涵盖种植、原料加工、终端产品制造等环节的产业体系。目前,芦荟多糖含量是评价芦荟产品质量的主要依据。由于芦荟多糖与其他植物和微生物来源的多糖相比,无明显特征,致使某些商家在芦荟产品中加入麦芽糊精,以提高芦荟产品中多糖的含量,这就造成了不含芦荟或搀假芦荟制品泛滥。因此,迫切需要建立芦荟凝胶特征成分指纹图谱鉴定技术,建立芦荟产品真伪鉴别和品质评价技术与方法,促进我国芦荟产业的健康发展。本论文以库拉索芦荟凝胶为研究对象,将芦荟凝胶全部化学成分分为大分子(多糖类)和小分子(蒽醌类)两类,然后分别建立凝胶渗透色谱(GPC)指纹图谱和高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,二者联合应用于芦荟凝胶产品的质量分析与评价。首先,本论文研究了库拉索芦荟凝胶中多糖成分的GPC分析条件以及同一产地和不同产地芦荟凝胶样品的GPC标准指纹图谱的建立方法与技术。确定GPC检测的最佳条件为:采用凝胶渗透色谱-示差折光检测器分析系统,串联使用KS-805和KS.803色谱柱,流动相为0.1mol/LNaN03溶液(含0.2‰NaN3),色谱柱温度60℃,检测器温度50℃,流动相流速0.8ml/min。在确定的GPC分析条件下,建立了北京地区和国内10个不同地区库拉索芦荟凝胶多糖的GPC标准指纹图谱,并对其适用性进行了分析。结果表明,北京地区10个批次样品间指纹图谱的相似度高达0.999,不同地区样品间的指纹图谱相似度也高达0.996,均符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的有关规定。其次,本论文研究了库拉索芦荟凝胶中小分子成分的HPLC分析条件以及同一产地和不同产地芦荟凝胶样品的HPLC标准指纹图谱的建立方法与技术。确定HPLC检测的最佳条件为:采用HPLC-DAD分析系统,使用Agela Venusil MP-C18柱(4.6×250mm,5μm)色谱柱,0.2%乙酸-甲醇以1.0ml/min的流速梯度洗脱,洗脱梯度(甲醇用量):5%(0min)-10%(10min)-40%(20min)-60%(40min),色谱柱温度35℃,检测波长254nm,进样量5μL。在确定的HPLC分析条件下,建立了北京地区和国内10个不同地区库拉索芦荟凝胶小分子成分的HPLC标准指纹图谱,并对其适用性进行了分析。结果表明,北京地区10个批次样品间指纹图谱的相似度均大于0.977,符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的有关规定;虽然不同地区样品间的指纹图谱相似度均大于0.856,但考虑到不同地区温度、湿度、光照等气候条件对芦荟凝胶成分积累的影响,用不同地区的HPLC指纹图谱判定某一芦荟产品的质量与品质时,可以将判定标准确定为相似度大于0.8。
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