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背景：细胞需要将内吞的一些大分子、液体、膜结构、膜蛋白等送回到细胞质膜，这种物质循环利用过程对胞质分裂、细胞迁移、细胞极性维持、突触可塑性等生物学过程至关重要。循环内体是循环运输过程中的细胞器，由管状囊泡及离散型囊泡所构成。RAB-10及其效应因子EHBP-1调控了管状循环囊泡的产生，同时还维持了管状循环囊泡的稳定。然而，对于管状循环囊泡的缢裂过程是如何发生的，迄今为止还不是十分了解。因此，我们进行了一次全基因组RNAi筛选，以期望找到更多的参与循环运输的调控因子。我们以rab-10(RNAi)作为阳性对照，期望找到和RAB-10缺失表型类似的候选因子。最终我们鉴定了包括SID-3、WIP-1、DBN-1、HUM-2、LET-413在内的54个蛋白，这些蛋白表达缺失均能够导致非网格蛋白依赖循环货物膜蛋白hTAC-GFP在细胞质中异常累积。其中SID-3蛋白属于ACK酪氨酸激酶家族，此前的研究显示其参与了dsRNA的转运过程。
目的：研究SID-3如何与EHBP-1、NCK-1、DYN-1等蛋白一起协同调控从早期内体到循环内体的囊泡运输过程。
方法：主要使用细胞生物学、生物化学技术手段，辅以遗传学实验来研究本课题。
结果：在秀丽隐杆线虫的极性肠细胞中，我们发现SID-3是一个重要的循环运输调控因子。RAB-10效应因子EHBP-1主导了SID-3的亚细胞定位。随后，我们发现EHBP-1、SID-3、NCK-1和DYN-1之间存在级联作用关系。DYN-1在SID-3缺失的情况下不能正确定位到管状循环内体上，同时，管状循环内体无法正常缢裂，提示SID-3协同下游的DYN-1促进了管状囊泡缢裂。与此推论一致，过表达DYN-1可以明显缓解SID-3缺失导致的循环运输障碍。最后，我们的实验表明循环运输缺失会降低饲喂RNAi效率，表明基底膜侧的循环运输对RNAi的组织间传递至关重要。
结论：在秀丽隐杆线虫肠细胞中，EHBP-1、SID-3、NCK-1以及DYN-1之间通过蛋白级联相互作用维持内吞循环运输的正常运行。SID-3在EHBP-1下游行使功能，与NCK-1和DYN-1协同作用直接促进了管状循环内体的缢裂过程。肠腔中的dsRNA通过SID-2介导的内吞进入肠细胞，经过基底膜侧的循环运输系统，被释放到假体腔。
目的：研究SID-3如何与EHBP-1、NCK-1、DYN-1等蛋白一起协同调控从早期内体到循环内体的囊泡运输过程。
方法：主要使用细胞生物学、生物化学技术手段，辅以遗传学实验来研究本课题。
结果：在秀丽隐杆线虫的极性肠细胞中，我们发现SID-3是一个重要的循环运输调控因子。RAB-10效应因子EHBP-1主导了SID-3的亚细胞定位。随后，我们发现EHBP-1、SID-3、NCK-1和DYN-1之间存在级联作用关系。DYN-1在SID-3缺失的情况下不能正确定位到管状循环内体上，同时，管状循环内体无法正常缢裂，提示SID-3协同下游的DYN-1促进了管状囊泡缢裂。与此推论一致，过表达DYN-1可以明显缓解SID-3缺失导致的循环运输障碍。最后，我们的实验表明循环运输缺失会降低饲喂RNAi效率，表明基底膜侧的循环运输对RNAi的组织间传递至关重要。
结论：在秀丽隐杆线虫肠细胞中，EHBP-1、SID-3、NCK-1以及DYN-1之间通过蛋白级联相互作用维持内吞循环运输的正常运行。SID-3在EHBP-1下游行使功能，与NCK-1和DYN-1协同作用直接促进了管状循环内体的缢裂过程。肠腔中的dsRNA通过SID-2介导的内吞进入肠细胞，经过基底膜侧的循环运输系统，被释放到假体腔。