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双生病毒是一类世界范围内广泛发生的植物单链环状DNA病毒,已在多个国家和地区的作物上造成危害,且有逐年加重的趋势。DNAβ是与某些单分体双生病毒相伴随的卫星分子,它能在自然寄主上引起典型症状。迄今发现的所有的DNAβ分子中都存在一个位置和大小都高度保守的βC1基因,它是一种致病决定因子。关于βC1基因启动子的研究,目前还未见报道。中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)是本实验室鉴定的伴随有DNAβ分子的单组分双生病毒,本论文分离鉴定了TYLCCNV-Y10 DNAβ分子上βC1基因的启动子,还研究了病毒和卫星编码蛋白对该启动子的调节作用;同时也分离鉴定了TYLCCNV-Y10的双向启动子。 利用根癌土壤杆菌介导的瞬间表达方法鉴定了TYLCCNV Y10分离物的DNAβ分子上βC1 ORF的启动予。用gus基因做为报告基因,通过组织化学法和荧光光度法测定启动子的活性,结果表明,βC1 ORF翻译起始点上游的955核苷酸(nt)片段具有启动子活性;5′端缺失的片段以及A-rich区缺失的片段均保留了启动子活性;3′端缺失的片段没有启动子活性。与花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子相比,955nt片段的启动子活性最高,是35S启动子活性的10～16%。组织化学检测表明,955nt片段能够驱动gus基因在转基因植株的韧皮部细胞特异性表达。进一步的研究表明,翻译起始点上游的173nt具有基础启动子活性并且能够在韧皮部特异性地表达。 将TYLCCNV-Y10互补链编码蛋白及DNAβ的βC1蛋白分别与卫星启动子表达载体在烟草叶片中瞬时共表达,研究互补链蛋白及βC1蛋白对卫星启动子的调节作用。结果表明,互补链蛋白AC1、AC2和AC4均能增强卫星启动子的活性,AC3对卫星启动子的活性没有影响;βC1蛋白能够增强自身启动子的活性。 利用根癌土壤杆菌介导的瞬间表达方法鉴定了TYLCCNV-Y10的双向启动子。通过组织化学法和荧光光度法测定启动子的活性,结果表明,病毒链和互补链方向的启动子均能够驱动gus基因表达,而且互补链启动子活性高于病毒链启动子活性。 将TYLCCNV-Y10 DNAβ的βC1蛋白与TYLCCNV-Y10的双向启动子表达载