天然纤维素酶法水解条件的研究

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本课题主要以木薯渣和甜高粱渣等纤维素材料的预处理和酶解为研究内容,寻找解决植物纤维素生物转化酶解的瓶颈的途径,为纤维素燃料乙醇的生产提供依据。   对于木薯渣酶解,通过1%的稀硫酸在120℃下预处理30-90min,当纤维素酶的添加量为20 FPU/g底物,在一定条件下酶解,纤维素转化率能达到80%左右,比没有经过处理的木薯渣酶解效率(62%)提高30%以上。对于高固含量的木薯渣酶解体系,分批补料酶解能够减少酶解液中的产物抑制作用,通过酶与底物按固定比例分两次加入分批补料的方法,对于固含量为25%的酶解体系,纤维素转化率可以达到84%,葡萄糖浓度和木糖浓度分别能达到39.5g/L和7.8g/L。通过这种分批补料方式,水解木薯渣产生的糖能够满足燃料乙醇生产的需要。   对于甜高粱渣酶解,研究发现120℃低温稀酸预处理的对甜高粱渣酶解的促进作用有限,当稀酸预处理温度达到150-180℃时,甜高粱渣的半纤维素含量降低到了2%左右,甜高粱渣表面出现大量小孔,增加了甜高粱渣的纤维素的表面积和可及性,从而对酶解有利。当稀酸预处理温度达到180℃时,酶解甜高粱渣的纤维素转化率达到50%左右,葡萄糖浓度达到25g/L左右,分别比未经过处理的甜高粱渣的转化率和葡萄糖浓度提高了33%和95%。高温预处理对酶解甜高梁渣的促进作用非常明显。   离子液体、爆破、碱处理和稀酸高温四种预处理方法对纤维素的结构影响实验表明:爆破和稀酸高温预处理对酶解的促进作用最强,其中爆破酶解纤维素转化率达到70%作用,是未经处理的甜高粱渣的酶解转化率的2.5倍。最终,预处理对酶解转化率的促进的大小顺序为爆破>稀酸高温>碱处理>离子液体。电镜照片显示,预处理后的甜高粱纤维素表面不同程度地出现裂缝、沟壑和小孔洞。预处理破坏了纤维素的内部结构,增加了纤维素的表面积和纤维素酶的可及性。红外、XRD、核磁检测结果表明,几种预处理对纤维素酶解的促进作用的主要方式是:都不同程度地减小了纤维素的晶粒尺寸,改变了天然纤维素的晶型,促进纤维素由Ⅰα和Ⅰβ晶型向表面微纤和无定形纤维素转变,从而降低了结晶度,改变了纤维素的内部结构和纤维素酶对纤维素的可及性,促进纤维素酶解效率。其中起主要作用的因素是甜高粱渣内部纤维素的可及性和表面纤维素的接触面积、纤维素内部分子之间的键的作用和纤维素由晶型Ⅰα和Ⅰβ向次晶的转化,无定形纤维素和结晶表面微纤维的生成。
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