【摘 要】
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铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)是一种分布广泛的条件致病菌，有多种毒力因子，如弹性蛋白酶、碱性蛋白酶和一些小分子的次级代谢物如鼠李脂、绿脓素(pyocyanin)等，所以常在
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铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)是一种分布广泛的条件致病菌，有多种毒力因子，如弹性蛋白酶、碱性蛋白酶和一些小分子的次级代谢物如鼠李脂、绿脓素(pyocyanin)等，所以常在临床上引起顽固性、难治性感染，成为临床治疗的棘手问题。绿脓素作为绿脓杆菌最重要的一种色素，具有很强的致病性。
本文以一株临床分离的铜绿假单胞菌PA68做受体菌，应用Mu转座复合物技术研究铜绿假单胞菌色素合成与调控的机制。
本文首次将Mu转座复合物技术应用到假单胞菌的功能基因组研究，成功优化条件将Mu转座复合物转入到铜绿假单胞菌PA68中，得到3.66x104CFU/μgDNA的高转化效率，构建了菌株PA68的Mu转座突变文库。通过一系列的表型筛选，得到8株色素合成能力改变的突变子。经基因克隆、核苷酸测序研究，证明转座子分别插入到hmgA、ptsP、sucC、phzS、phzF1五个基因中。hmgA基因转座失活导致酪氨酸分解代谢中间产物尿黑酸的积累，后四种情况转座突变显著地影响了铜绿假单胞菌最重要的色素——绿脓素的合成，其中phzS和phzF1是绿脓素合成过程中的结构基因，ptsP基因是一个磷酸转移酶系统的重要组分，sucC基因的产物是三羧酸循环中的琥珀酰辅酶A合成酶。通过遗传互补和同源重组实验，进一步证明了ptsP基因在绿脓素生物合成代谢中的调节功能。
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