本研究分为两大部分:其一,MMP-3基因多态性与乳腺癌的关联分析;其二,中药龙泉复方抗肿瘤机制的研究。以下分别概括:1.乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,MMPs是基质金属蛋白酶,具有降解细胞外基质等功能,发现在多种肿瘤的发生和侵染过程中发挥重要作用。本研究旨在探讨MMP-3基因单核苷酸多态性与乳腺癌的关联关系。选择MMP-3基因启动子区-1171 5A/6A、2号外显子rs679620(Lys45Glu)、5号外显子rs41357345(Arg248Trp)等3个SNPs位点作为研究对象,利用PCR-RFLP的方法对外周血样品各个位点进行基因分型,以湖北省武汉市散发乳腺癌病例195人和湖北武汉正常人群235人做病例-对照分析。统计结果发现,rs41357345在所选择的样品中全为C/C型,没有呈现多态性。-1171 5A/6A和rs679620两位点在病例组和对照组的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡,单位点SNPs与乳腺癌的关联呈阴性(P≥0.05)。-1171 5A/6A和rs679620两位点连锁不平衡(D’=0.763,r2=0.187)。计算单倍型频率并分析发现,-1171 5A/6A和rs679620两位单倍型频率在对照组和病例组没有显著差异(Global P值为0.747)。-1171 5A/6A和rs679620两位点多态性可能与乳腺癌的遗传易感没有显著的关联。由于选择的病例组和对照组的样本均较少,使得研究的统计效力较低;并且实验中选择的SNPs位点数也较少,不能整体代表MMP-3基因的多态性;所以MMP-3基因多态性与乳腺癌的关联关系还需进一步的研究。2.湖北省肿瘤医院中西医结合科应用“龙泉复方制剂”治疗多种癌症。“龙泉复方”主要是由喜树果、龙葵、马钱子、山慈菇、紫菀、青黛、石上柏、灵芝和黄芪等九味中草药构成。本研究旨在探寻中药龙泉复方的抗肿瘤机制,为中药理论提供一定的理论基础。本研究从植物化学和药物血清生理学两个方面着手。很多生物碱具有抗肿瘤功能,并且龙泉复方的中药材中,喜树果、龙葵、马钱子、山慈菇和紫菀中富含生物碱。利用常规的生物碱提取方法溶剂萃取法,分别获得喜树果总碱、龙葵总碱、山慈菇总碱、紫菀总碱和龙泉复方总碱。据MTT实验发现,单方总碱均具有很强的抗肿瘤作用,而复方总碱抑制肿瘤细胞生长的能力较弱。以家兔为实验动物,制备中药龙泉复方制剂的含药血清,根据MTT实验,含药血清具有很强的体外抑制肿瘤细胞生长作用。生物碱是龙泉复方抗肿瘤的有效成分之一。复方总碱体外抗肿瘤能力弱,可能是由于在复方乙醇浸提和萃取过程中,发生了复杂的化学反应,使得有效成分活性减低。中药血清模拟人体消化吸收中药复方的过程,体外实验表明中药抗肿瘤一部分是药物可以直接杀死肿瘤细胞;然而更重要的一部分是,中药在人体经吸收后产生的各种分子或蛋白,通过刺激人体免疫系统表现出更好的抗肿瘤作用。中药在人体内的吸收和对各种人体或细胞调控机制的影响,还需要进一步的研究。