蛋白水解酶的水解过程对于正常的生理功能是必需的,包括正常的血管维持,血管的形成,凝块的形成和溶解,骨的重塑以及排卵等。这些酶系统的上述作用同样适用于癌细胞的生长和迁移,通过降解基底膜以及细胞外基质,以利于细胞的迁移。降解胞外基质的蛋白水解酶主要包括三种:基质金属蛋白酶,半胱氨酸蛋白酶以及丝氨酸蛋白酶。其中丝氨酸蛋白酶中的uPA系统起着重要的作用。在uPA系统中,uPA/uPAR作用更为重要。以往的研究表明,uPA/uPAR在正常皮肤中无表达,但在皮肤的肿瘤组织以及创伤后表达强烈。但以往的研究对uPA/uPAR在胚胎发育期的情况以及功能方面研究较少;在创伤愈合过程的早期,uPAR表达强烈,但其作用如何,以往文献未见报道。因此,本研究以uPA/uPAR为研究对象,首先,通过免疫组织化学以及原位杂交技术研究uPA/uPAR在胚胎发育期皮肤及毛囊的表达情况;由于人体研究的局限性,通过构建含uPA ATF以及uPAR的绿色荧光蛋白,并分别转染到小鼠永生化细胞株Pam 212,分别检测转染后对细胞增殖迁移的影响;将构建的绿色荧光蛋白经注射、电穿孔后观察对在体小鼠创伤愈合的影响。主要结果如下:1、采用免疫组织化学及原位杂交技术检测在胚胎发育期皮肤及毛囊中uPA的表达情况。以往我们的研究表明,在胚胎发育期皮肤和毛囊中有uPAR蛋白及mRNA的表达。uPA与uPAR一般相伴而生,结果发现:(1)在胚胎发育期的表皮及毛囊中有uPA的表达;(2)在毛囊发育的起始阶段,uPA蛋白及mRNA主要在表皮的基底层、最外层、皮上层以及毛囊芽中表达;在延长期,在表皮的表达与起始阶段相似,在毛囊的最外层有表达;在球形毛囊钉期和分化的阶段早期,表皮的基底层以及毛囊的外根鞘中有表达,并且在毛囊隆突区也有着色,而在胚胎晚期未检测到表达。(3)uPA的表达强度表现为逐渐升高,而在分化期表达较高,然后降低,直至未能检测到。本实验结果表明,在胚胎发育期的正常皮肤及其附属器毛囊中有uPA/uPAR的表达,并且推测表达与表皮及毛囊细胞的增殖、迁移相关。