长链非编码RNA GACAT3在肝细胞癌中的表达及其功能研究

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目的:肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma)是世界范围内常见的高致死率恶性肿瘤。目前肝癌的早期诊断和治疗方法如手术切除、局部消融、经导管动脉化疗栓塞以及肝移植等取得了很大的突破,肝癌患者的治疗取得了很大的进展。然而,在肝癌术后患者中,肿瘤的转移和复发极为常见,总体生存率仍不乐观。目前,由于对HCC的病理分子机制认识不足,有效的治疗手段非常有限。因此,寻找一种对指导HCC治疗有重要意义的有效的生物标志物是至关重要的。长链非编码RNA((long non-coding RNA,LncRNA))被定义为长度大于200个核苷酸的非编码蛋白RNA分子。据报道,长链非编码RNA GACAT3(LncRNA GACAT3)参与了乳腺癌、结直肠癌、非小细胞肺癌和胃癌的发生发展。然而,它是否与肝细胞癌有关尚未阐明。本研究拟通过qRT-PCR检测肝癌组织与癌旁组织中GACAT3的表达情况,并了解与临床病理资料的关系。通过RNA干扰技术、CCK8实验以及Transwell实验检测肝癌细胞增殖与侵袭转移能力的改变。方法:收集62例肝癌及配对癌旁组织,通过qRT-PCR检测肝癌组织与癌旁组织中GACAT3的表达情况,并分析其与临床各病理因素的关系。选取1种正常肝细胞系(LO2)及3种肝癌细胞系(HepG2、SMMC7721、Huh7),运用qRT-PCR检测其表达情况。通过RNA干扰技术敲除GACAT3在肝癌中的表达,并通过qRT-PCR检测其转染效率。同时通过CCK-8增殖试剂盒,Transwell实验检测其对肝癌细胞增殖及转移侵袭能力的影响。结果:通过qRT-PCR检测62例肝癌组织与癌旁组织中及正常肝细胞系与肝癌细胞系的表达情况,肝癌组织较癌旁组织表达含量明显增高(P<0.05),3种肝癌细胞系较正常肝细胞系表达含量明显增高(P<0.05),进一步分析其与临床病理的关系,发现GACAT3的表达水平与肿瘤分化、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05),而其与年龄、性别和AFP高低无明显关系(P>0.05)。通过转染干扰GACAT3后肝癌细胞增殖、侵袭及转移能力明显减弱(P<0.05)。结论:GACAT3在肝癌组织及肝癌细胞系中高表达,且其表达水平与肿瘤分化、淋巴结转移和TNM分期有关。转染干扰GACAT3的表达,减弱了肝癌细胞的增殖、侵袭及转移能力。
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