目的 先天性马蹄内翻足(congenital clubfoot，CCF)畸形包括前足内收，跟骨内翻和踝关节马蹄。病因多集中在遗传、神经等。在多数研究中，对其病理演变过程仍不详尽，故有必要对畸形何时发生、其病理演变过程如何，影响畸形严重程度的因素做深入研究。应用建立实验动物模型和体感觉诱发电位(somatosensory evoked potentials，SSEPs)等方法检测马蹄内翻足的中枢及外周神经功能情况，旨在进一步明确马蹄内翻足的病因及确定神经病变位点。 方法 一、模型建立及分组 83只雌性Wistar大白鼠随机分为对照组(15只)和实验组(68只)，体重(230±11g)。实验组：从怀孕第十天起，将120mg／kg维甲酸(retinoic acid，RA)与石蜡油混悬液(40mg／ml)经胃管一次注入。其中第19天实验组各以120mg／kg、130mg／kg、140mg／kg的RA石蜡油混悬液经胃管一次注入。对照组：仅将不含RA的石蜡油同量同前注入。分别在大鼠孕期第17d(对照组4只、实验组16只)、第19d(对照组5只，实验组计36只：其中120mg／kg组16只、130mg／kg9只、140mg／kg11只)、第21d(对照组6只、实验组16只)剖宫取出胎鼠。对照组186只胎鼠中97足和实验组592只胎鼠中91只畸形足，行下肢和足相交的踝角测量(踝角系小腿和足纵轴所形成的角度，包括马蹄内翻)并将对照、实验组胎鼠后肢切取及胸腰段脊髓取材，Formalin液固定、石蜡包埋。胎鼠后肢分别在矢状、冠状及水平面连续切片，HE染色，脊髓尼氏染色(亚甲蓝法)，光镜下观察；另分别切取后肢、胸腰段脊髓后戊二醛固定、包埋、切片定位脊髓前角，经醋酸铀-柠檬酸铅 双重染色，在透射电镜下观察。 二、临床资料 自221 年2月－2002年12 月，共检测4例正常儿童和CCF患儿48 例，男32例，女历例；双侧发病15例，单侧33例，共计63足。年龄3个月 －13岁，平均2．7岁；3个月－二周岁17例，男8例，女9例，平均7．7个月； 列周岁3二例，男凹例，女7例，平均5．9年。患儿均未经手术治疗。依据 Pavlocic和Simons评估方法分为：轻度15足O 例，其中双侧2例，单侧11 例h中度31足＊3例，其中双侧8例，单侧15例八重度17足O 例，其中 双侧 5例，单侧 7例人应用 Nicolet公司 Viking IV肌电诱发电位仪，分别测 定双腔神经SSEP、双下肢神经传导速度（ne。e conduction velocity，NCV）、双 胶神经H反射（H－reflex人 （一）SSEP检测 鞍状刺激电极置于踝部腥神经所在处，以方波 2．7 HZ进行刺激，强度 ＜smA、以产生路短展肌轻度收缩为标准。记录电极分别于胭窝、腰四、颈 七及头部左右中央（国际脑电图电极安放10／20系统Cz旁开Zcm）记录诱 发电位信号。 （二）NCV检测 腥神、传导检测：常规法放置电极，刺激位点分别为内踝及胭窝胚神经 走行处，频率为1．OHZ。记录电极置于路短展肌，记录复合肌肉动作电位 （compotmd motor achon potentids，CMAPs），计算传导速度。 脐总神经传导检测：刺激电极置于中踝及胖骨小头下，频率为＊OHZ， 记录电极置于趾短伸肌进行记录CMAP。 胖肠神经传导检狐：刺激电极常规法置于外踝，记录电极置于胖肠肌上记录感觉神经动作电位卜ensihve nerve action POtentials，SNAPsX频率为 1．OHz。 （三）腔神经H反射检测 刺激电极置于胭窝。采用频率为0．SHz，时限为0．Zrns，脓肠肌记录电极记录H波和贝波。 “结 果 一、动物实验结果： ·2· 实验组O20mg／kg组入共取出胎鼠 592只，出现马蹄内翻足为 318 ．q（53．7助）。其中第 17d 为 33．5呢、第 19d 为 54畅、第 21d为 73．7％。胎鼠单足发病占79．3％，双足为20．6畅；对照组共取出胎鼠186只，无畸形出现。畸形严重程度以第 ZId组为重。其他相关畸形尚有颌面畸形＼脊柱裂等。畸形足发生了旋转改变，足跃向内、足的后外侧缘着地，踝角则明显增大呈马蹄内翻位，在严重病例中踝角可达175、 （一）光镜观察结果： O）对照组：第17d组见距骨和跟骨不在同一平面，距骨内倾且背屈，跟骨偏外。第19d组距骨内倾程度较轻。矢状位显示距骨、跟骨部分重叠。第 21组解剖结构同人类相似，横断面可见跟腥位跟骨后侧；矢状位显示距骨、跟骨明显重叠。 K）实验组：第17d组见小腿肌肉较对照组萎缩，附骨小且失正常形态。距骨、跟骨在同一解剖面，两者被间叶组织分割。距骨较对照组小、滑车较平，跟骨内翻，跟腥内倾。第19d组见距骨变小、滑车较平。矢状位显示距骨、跟骨重叠不足；跟骨内翻较前严重，附骨小且失形态。脊髓前角神经元减少，胶质细胞增加。第 Zld组见踝关节呈马蹄，距骨变小、滑车变平；前足切片见胶骨和跑骨在同一解剖面，跟骨内翻严重且距、跟骨间重叠不良，跑骨小且失形态。脊髓前角神经元明显减少，胶质细胞增加。 （二）实验组透射电镜观察 第19d组：小腿和足软骨及肌肉细胞中有变性、凋亡现象，距骨表面软骨