重组绿色电致化学发光蛋白及其免疫分析应用

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高灵敏度、广通用性的生化分析方法对于生物医学、环境研究、食品学等学科的发展至关重要。电致化学发光技术在检测应用中具有灵敏度高、可控性好、分析速度快、应用范围广等优点,已经被广泛应用于食品分析和环境检测、生化试剂检测与免疫检测分析中。许多材料都能发生电致化学发光现象,寻找更高效率的发光体或者修饰发光体用于生物分子标记是目前的研究重点。其中卟啉作为电致化学发光体具有独特的发光性能,可以通过将卟啉与DNA、纳米材料或合适的生物蛋白组装,以此提高卟啉基发光材料的电致化学发光的稳定性及效率。本文围绕卟啉基电致化学发光材料进行实验。选择一种电致化学发光性能较好的卟啉化合物,以细胞色素C、血红蛋白、肌红蛋白为原材料,通过酸性条件下将辅基分离,制备脱辅基细胞色素C、脱辅基血红蛋白及脱辅基肌红蛋白,然后与卟琳结合制备重组蛋白,通过紫外吸收光谱,荧光发射光谱以及电致化学发光等检测方法的检测结果表明,对比卟啉单体,重组肌红蛋白电致化学发光性能更稳定、活性更强,并且利用重组肌红蛋白构建早期癌症标记物-血管上表皮生长因子(VEGF)检测传感器,实验结果证明传感器检测灵敏度高,选择性好,稳定性好,在实际应用中具有较大的应用价值。
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