仔猪猪瘟免疫程序的研究

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猪瘟(Hog Cholera,HC或Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(HCV或CSFV)引起的一种高度接触性热性传染病。以出血和发热为主要特征,并引起妊娠母猪流产、胎儿畸变、慢性营养性消耗、淋巴细胞和血小板减少等免疫系统受损、继发或并发细菌或其他病毒感染等临床表现,呈急性或慢性经过,是一种对猪危害性极大的传染病,被国际兽疫局(OIE)列为必须上报的疾病。一直以来我国采用猪瘟疫苗免疫对猪瘟进行预防和控制,在降低猪瘟的感染率和发病率方面取得了很好的效果,但是近年来在实际生产中猪瘟仍时有发生,特别是仔猪的非典型猪瘟更为常见。仔猪发生猪瘟除了首免时间不当,母源抗体对免疫接种猪瘟疫苗的干扰作用造成的免疫失败之外,实际的免疫效果也是很重要的一个因素。同时,对猪瘟疫苗质量的评定,也是猪瘟免疫的重要前提。本研究共分为三个部分:1、采用阻断ELISA试验方法对不同日龄仔猪的猪瘟母源抗体进行系统检测,其结果表明:哺乳前仔猪抗体水平为0,第1d抗体水平达到最高,之后缓慢下降。30日龄平均抗体水平仍然在保护水平之上,因而过去常用的20日龄首免时间应该推迟;根据20日龄仔猪断乳时的抗体效价和30日龄的抗体效价推算,仔猪猪瘟母源抗体半衰期为6.8天。2、采用阻断ELISA试验方法检测三种不同猪瘟免疫程序对仔猪的免疫效果,免役程序分别为(0、35,60)、(0、60)和(35、60),其结果表明:对仔猪进行超前免疫(0、60)的免疫效果比其他免疫程序的免疫效果好。不同疫苗免疫的仔猪猪瘟抗体检测结果表明,仔猪平均抗体阻断率差异极显著(P<0.01),因而制定适宜的免疫程序,应该根据猪瘟疫苗质量而定。3、利用荧光定量RT-PCR和阻断ELISA试验方法分别对猪瘟疫苗的病毒含量和猪瘟疫苗中外源病毒(BVDV)的污染进行了检测。荧光定量RT-PCR对猪瘟疫苗病毒含量检测的结果表明:15种猪瘟疫苗中的病毒含量存在很大差异,从0.87×106~38.45×106病毒颗粒数/头份不等。此方法操作简单,速度快,定量准确,重复性好,可以在短时间内同时对大量样品进行定量检测,因而作为猪瘟疫苗效价的评定是可行的。但是荧光定量RT-PCR对操作人员的熟练程度要求严格;猪瘟疫苗中BVDV抗原检测的结果表明:3种脾淋苗中都没有BVDV抗原,而12种细胞苗中,有6种检测BVDV抗原阳性,污染率达50%。因此,猪瘟疫苗中外源病毒(BVDV)污染的检测,也是疫苗合格与否的重要指标。总之,对猪瘟疫苗质量的评定是猪瘟免疫的重要前提。
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