3-溴丙酮酸对人卵巢癌细胞的抑制作用

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卵巢恶性肿瘤在女性生殖器肿瘤中的发生率占第三位,但死亡率却位居第一位。由于卵巢特殊的解剖结构特点,大多数患者就诊时已属晚期。尽管卵巢肿瘤细胞减灭术和化疗水平不断进步,但卵巢癌的五年生存率并没有显著提高,仍然是死亡率高的妇科恶性肿瘤,因此寻找新的治疗方法及药物迫在眉睫。以3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)为代表的抑制糖酵解限速酶为作用靶点的糖酵解酶抑制剂,在抗癌领域的研究取得了突破性进展,尤其是对肝癌细胞的抑制作用研究取得了令人可喜的成果。但作为抗癌药物,3-BrPA的研究尚处于初级阶段,国外报道甚少,国内目前尚未见到3-溴丙酮酸抗癌作用的研究报道。因此本研究旨在国外学者研究成果的基础上,利用现代细胞生物学、分子生物学技术等方法,就3-BrPA对人卵巢癌细胞SK-OV-3的生长抑制作用进行了观察,为颇有前途成为抗癌新药的3-BrPA在抗癌领域的应用与开发提供理论及实验依据。1.方法实验分为对照组(RPMI1640培养液)和实验组(3-BrPA:100μg/ml、50μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml、6.25μg/ml、3.125μg/ml)。采用MTT(二苯基四氮唑溴盐)比色法和集落形成试验检测3-BrPA对SK-OV-3细胞的生长抑制作用;采用电子显微镜技术观察3-BrPA作用前后SK-OV-3细胞的形态学改变;采用流式细胞术检测SK-OV-3细胞凋亡,并对细胞周期的变化进行分析。2.结果MTT检测结果表明3-BrPA对SK-OV-3细胞的生长有明显的抑制作用(P<0.05),这种抑制作用随3-BrPA作用时间的增加而增加,且3-BrPA浓度为25μg/ml时抑制率最高;3-BrPA作用SK-OV-3细胞后细胞集落形成率明显降低(P<0.01);流式细胞术捡测结果显示3-BrPA作用后的SK-OV-3细胞在25μg/ml~100μg/ml之间有效诱导细胞凋亡。经3-BrPA作用SK-OV-3细胞后,G0/G1期和S期细胞百分率明显减少,而G2/M期细胞百分率明显增加。电镜下观察到经过3-BrPA作用后的SK-OV-3细胞可出现凋亡和坏死两种形式的细胞形态改变。3.结论3-BrPA对人卵巢癌细胞SK-OV-3增殖具有明显的抑制作用,而且这种抑制作用与3-BrPA的作用时间呈正相关,3-BrPA可以通过诱导细胞凋亡和导致细胞坏死两方面作用抑制SK-OV-3细胞的生长,使细胞阻滞于C2/M期。
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