紫杉醇对人甲状腺未分化癌细胞体外作用的实验研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaomay2
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:1.观察不同浓度的紫杉醇对人甲状腺未分化癌细胞DRO生长的影响。2.研究紫杉醇能否阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡。3.通过测定VEGF、bcl-2及bax在紫杉醇作用前后的变化,探讨紫杉醇治疗甲状腺未分化癌的可能的分子机制。方法:1.细胞培养人甲状腺未分化癌DRO细胞株,培养于含有10%胎牛血清,1×105U/L青霉素和链霉素、0.1 mmol/L MEM非必需氨基酸、1 mmol/L丙酮酸钠的培养基中,置37℃、5%CO2培养箱培养,2~3天换液1次。用0.25%胰酶常规消化传代,取对数生长期细胞进行实验。2.细胞增殖抑制实验采用MTT法,检测经不同浓度的紫杉醇溶液(浓度分别为0、6.25、12.5、25、50、100μg/L,每个浓度设3个复孔,0μg/L紫杉醇为对照组),分别培养24、48、72小时,在酶标仪492nm波长处读取吸光度A值。存活率(%)=实验组A值/对照组A值×100%,抑制率(%)=(1-存活率)×100%。作图法得出半数抑制浓度IC50。3.细胞周期和细胞凋亡率的测定采用流式细胞仪技术,0μg/L(对照组),6.25μg/L(实验组)紫杉醇分别作用DRO细胞24、48、72小时,在FACSCalibur双激光流式细胞仪上检测细胞周期和细胞凋亡率的变化。4.采用RT-PCR方法测定经0μg/L(对照组)、6.25μg/L(实验组)紫杉醇作用48小时后DRO细胞VEGF mRNA、bcl-2mRNA及bax mRNA表达的变化。结果:1.紫杉醇对细胞生长的影响不同浓度紫杉醇与DRO细胞共同培养后,细胞生长受到抑制,并呈剂量、时间效应关系,72小时的IC50为10μg/L。2.紫杉醇对细胞周期和细胞凋亡的影响实验组紫杉醇作用于DRO细胞可将细胞周期阻滞于G2/M期,与对照组比较24小时即可检测到明显的G2/M期阻滞,48、72小时后紫杉醇G2/M期阻滞作用逐渐减退;紫杉醇能够诱导细胞凋亡,G2/M期阻滞作用后,流式细胞仪可检测到明显的凋亡峰,48小时凋亡达高峰,凋亡率为32.76%±1.54%,以后渐降低。3.VEGF mRNA、bcl-2 mRNA及bax mRNA的表达变化VEGF mRNA在紫杉醇作用后表达减低,bax mRNA在紫杉醇作用后表达增强,而bcl-2 mRNA在作用前后表达无明显变化。结论:1.紫杉醇在体外具有抑制人甲状腺未分化癌DRO细胞增殖的作用,这种作用与剂量、时间呈正相关。2.紫杉醇不仅可将DRO细胞阻滞于G2/M期,还可以诱导其凋亡,低浓度紫杉醇即能显著诱导凋亡,对临床应用紫杉醇提供一定的参考价值。3.紫杉醇能够下调DRO细胞中VEGF mRNA表达水平,为紫杉醇抗甲状腺未分化癌血管生成提供一定的实验依据。bcl-2可能并不参与紫杉醇阻滞细胞周期、诱导DRO细胞凋亡的过程,而bax在此过程中可能发挥着重要的作用,可能是紫杉醇诱导细胞凋亡的重要靶基因。
其他文献
简单介绍了费尔哈斯特模型的基本原理和建模步骤,结合工程实际观测沉降数据来建模分析CFG短桩复合地基的沉降规律,并对比实际沉降观测结果来验证得到曲线公式的可靠性。对CFG
【摘要】创新教育是实现新时代素质教育的目标,本文通过转变教育观念,改进教学方法,提高自身素质三方面阐述了达到创新教育践行的方法和要点,揭示了创新教育践行对幼儿的发展和影响。  【关键词】创新教育 素质教育  实施素质教育的关键在教师,实施素质教育的途径在创新。直面当今知识经济时代,教师负有培养和造就具有创新意识和创新能力的高素质人才的重任。江泽民同志曾指出:“迎接未来科学技术的挑战,最重要的是坚持
以长春市某污水处理厂初沉池出水为原水在实验室进行了低温污水处理模拟试验,研究了低温活性污泥EPS特性及其对污泥沉降性能的影响。试验温度控制在15℃、13℃、11℃、9℃、7
<正>一、双因素理论概述双因素理论是美国行为科学家赫茨伯格于20世纪50年代,对一群匹兹堡心理研究中心的人员作了一项大规模的访问研究,对匹兹堡地区11个行业的200多名工程
案情回顾《中国质量技术监督》201 5年第9期"抛砖引玉"栏目刊登的《这台电梯能办注册登记吗》介绍了这样一起案例:2015年7月30日,A公司(电梯使用单位)电梯管理人员携带公司组织机
行政管理是高校管理的重要组成部分,学校运行效率与发展前景在一定程度上取决于行政管理.在高校逐步发展的过程中,提高行政管理质量,分析高校行政管理中存在的问题,已经成为