目的：①分离、筛选出具有较高转酯活性的产脂肪酶酵母菌，并优化其产酶培养条件。②利用全细胞催化方法，催化合成生物柴油，并分析其催化特性。 方法：⑴以橄榄油为唯一碳源进行富集培养，以Rhodamine B为指示剂进行平板筛选，得到产脂肪酶菌株；利用滴定法、平板扩散法以及进行转酯反应实验，最终筛选出具有转酯活性脂肪酶的菌株；同时初步优化其中一株酵母菌的培养条件。⑵利用筛选出的酵母菌作为催化剂，以叔丁醇为溶剂，全细胞催化橄榄油与碳酸二甲酯反应生产生物柴油。⑶利用酸热法提取部分产油脂酵母的油脂，并催化其生成生物柴油。 结果：①进行了大量的产脂肪酶酵母菌的筛选工作。以橄榄油为唯一碳源，利用Rhodamine B作为指示剂进行了平板筛选实验，从新疆石河子地区10分土样中，筛选到了90株有脂肪酶活性的酵母菌。滴定法测量野生菌株脂肪酶活力，每1mL培养液脂肪酶活力：1.1-6.6U。其中B9，C1，E7，F12等有成为生物催化剂的潜力。扩增了其中脂肪酶活性较高的9株的18s rDNA，测序后BLAST并进行系统进化树分析，结果表明所得菌株分别与Candida.，Rhodotorula.，Trichosporon.等属亲缘关系接近。将其中6条18s rDNA序列登录GenBank（FJ538165-FJ538170）。②对筛选到的菌株F12液体摇瓶生产脂肪酶的条件进行了优化。确定其最适产酶条件如下，每1L培养基：橄榄油+蔗糖（10：1）混合碳源20.0g，蛋白胨60.0g，K2HPO41.0g，MgSO40.5g，pH7.0；培养温度为30℃，摇床转速200r/min，摇瓶装样量为50mL（250mL三角瓶），接种1mL，最佳培养时间48h。③优化菌株F12产酶条件后，F12脂肪酶活力由最初的4.95U/mL提高到16.0U/mL增幅223％。以叔丁醇为溶剂，全细胞催化橄榄油与碳酸二甲酯反应生成了脂肪酸甲酯，即生物柴油。④在筛选到的产脂肪酶酵母中发现了若干积累油脂的菌株，提取了其中两株酵母菌的细胞内油脂，并利用其作为原料，反应生成生物柴油。实验表明，部分菌株同时具有脂肪酶催化能力和积累油脂的能力。 结论：⑴筛选出若干具有脂肪酶活性的酵母菌，初步鉴定，所得菌株分别与Candida.，Rhodotorula.，Trichosporon.等属亲缘关系接近。其中B9，C1，E7，F12等菌株具有转酯活性，有成为生物催化剂的潜力。⑵通过对产酶条件的优化，使菌株F12活力增长到16.0U/mL；在以叔丁醇作为溶剂的体系中，全细胞催化橄榄油与碳酸二甲酯反应生成生物柴油。⑶筛选到的部分酵母可在细胞内积累油脂，可利用其生产生物柴油。某些菌株同时具有脂肪酶催化能力和积累油脂的能力。