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lncRNAs是长度超过200个核苷酸的非编码RNA,可作为ceRNA通过结合miRNAs调控mRNA表达,在细胞中发挥多种作用。研究表明lncRNAs的异常表达与肿瘤发生发展相关,本研究对非小细胞肺癌中lncRNA GLIDR、miR-342-5p参与调节PPARGC1A的表达及机制进行了研究。1.lncRNA GLIDR在非小细胞肺癌中的表达及作用本研究首先检测了lncRNA GLIDR在非小细胞肺癌H460和A549细胞中的表达及亚细胞定位。结果显示,lncRNA GLIDR的表达主要定位于细胞质,与正常肺上皮细胞HBE相比,lncRNA GLIDR在H460和A549细胞中表达明显升高。通过si RNA沉默lncRNA GLIDR表达后,H460和A549细胞凋亡增加,细胞周期发生阻滞,细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力显著抑制,而过表达lncRNA GLIDR显著促进了裸鼠肿瘤的生长,表明lncRNA GLIDR具有致癌基因的作用。使用miRDBase、Lnc Base V.2等生物信息学软件预测发现miR-342-5p、miR-524-5p和miR-6886-3p可靶向lncRNA GLIDR,双荧光素酶报告实验证实miR-342-5p和lncRNA GLIDR具有直接相互作用。miR-342-5p在H460和A549细胞中表达均明显低于正常肺上皮细胞HBE,抑制其表达后可显著促进H460和A549细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,而过表达miR-342-5p降低体内成瘤能力。进一步检测显示,敲减miR-342-5p后lncRNA GLIDR表达上调,而敲减lncRNA GLIDR后miR-342-5p表达上调,表明二者负相关。挽救实验证明,敲减lncRNA GLIDR可降低miR-342-5p敲减所导致的恶性表型。2.lncRNA GLIDR/miR-342-5p/PPARGC1A轴在非小细胞肺癌中的调节研究利用miRNDB、KEGG等软件预测发现PPARGC1A是miR-342-5p的靶基因,qRT-PCR和Western blot检测表明PPARGC1A在非小细胞肺癌中mRNA和蛋白表达量上调,双荧光素酶报告实验验证了miR-342-5p直接作用于PPARGC1A。利用过表达载体PPARGC1A-pIRES2-Zs Green1转染细胞后能显著促进H460和A549细胞的恶性表型。免疫组化和免疫荧光实验表明,过表达miR-342-5p后,PPARGC1A蛋白表达量显著降低。挽救实验证明,过表达miR-342-5p可降低PPARGC1A过表达导致的细胞迁移、侵袭和增殖等恶性表型。进一步检测表明,抑制lncRNA GLIDR表达后PPARGC1A mRNA表达下调;Western blot检测表明,过表达lncRNA GLIDR可减弱miR-342-5p对PPARGC1A的抑制作用,挽救实验显示,过表达PPARGC1A可恢复lncRNA GLIDR促进H460细胞的增殖、迁移和克隆形成的作用。综上所述,lncRNA GLIDR作为ceRNA能与miR-342-5p竞争性结合调节PPARGC1A的表达,从而调节肿瘤细胞恶性表型。本研究表明lncRNA GLIDR/miR-342-5p/PPARGC1A轴在非小细胞肺癌的诊断和治疗中具有潜在的应用价值。