作为地球最丰富的生物质能源,木质纤维素可经纤维素酶降解为葡萄糖进而转化为生物乙醇等燃料,但由于木质纤维素高度复杂的结晶结构致使木质纤维素的酶解受到了阻碍。纤维素酶增效蛋白作为一种非水解性蛋白,已被认为是提高纤维素酶水解效率,减少酶载量的选择。本实验室克隆构建了一株来源于甘薯链霉菌的含增效蛋白基因的重组菌,SipoEXLX2为增效蛋白基因的表达产物。在前期纯化中未能得到单一条带的SipoEXLX2目的蛋白。因此,本文开展了SipoEXLX2增效蛋白的表达纯化、作用机理和协同纤维素酶降解碱处理水稻秸秆等工作,实验结果如下:通过重新构建质粒载体,在C-末端增加His标签,纯化得到了纯度大于90%,协同增效大于1倍的SipoEXLX2增效蛋白。经过诱导条件优化,SipoEXLX2蛋白在IPTG为1M,16℃诱导12h的条件下,目的蛋白上清中的表达量达到约35 mg/L。SipoEXLX2增效蛋白协同纤维素酶降解滤纸的影响因素和作用机理研究。SipoEXLX2增效蛋白协同纤维素酶的最佳协同条件是pH 4.8、温度50℃、250μg SipoEXLX2增效蛋白和0.06 FPU/g cellulose纤维素酶载量。SEM、FTIR、XRD、和万能试验机对SipoEXLX2增效蛋白预处理前后的滤纸进行检测分析。滤纸经SipoEXLX2增效蛋白预处理后,SEM显示滤纸表面结构疏松,结晶度降低;FTIR显示滤纸的氢键强度和结晶度分别下降了 25.6%和2.7%;由于滤纸处理问题,XRD显示滤纸结晶度提高1.2%;万能试验机显示滤纸的拉伸强度下降6.4%。此外,SipoEXLX2增效蛋白能提高纤维素酶的热稳定性。SipoEXLX2增效蛋白协同酶解碱处理水稻秸秆的因素考察。分别在SipoEXLX2增效蛋白加入量为300 ug,底物固含量为2%和酶载量为0.90 U/g substrate条件下,SipoEXLX2增效蛋白对协同降解碱处理水稻秸秆的影响效果最佳,还原糖产量最大提高21.3%。实验结果表明SipoEXLX2增效蛋白能提高对预处理的纤维底物的降解,其在纤维原料水解中具有潜在应用价值。