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目的：
通过制作糖尿病ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型，采用大蒜素进行干预，研究大蒜素对该动物模型的干预作用及其作用机制，探讨大蒜素在保护血管内皮作用机制中与糖脂代谢紊乱、氧化应激反应、炎症反应的相关性。为临床防治糖尿病大血管病变提供实验支撑。
方法：
选8周龄ApoE-/-雄性小鼠80只，体重25±5g。随机分为对照组（n=20）、实验组（n=60），对照组不做任何处理，普通饲料喂养；实验组将先后通过腹腔注射STZ、颈动脉套管、含3%蛋氨酸高脂饮食，制作糖尿病动脉粥样硬化小鼠动物模型，造模后适应性喂养1周。将糖尿病小鼠分为模型组（双蒸水，0.15ml/d，n=20）、大蒜素低剂量组（大蒜素，10mg/kg，0.15ml/d，n=20）、大蒜素高剂量组（大蒜素，20mg/kg，0.15ml/d，n=20），模拟药物的防治作用，于灌胃8周后，留取血样本，测定血脂（TG、LDL、TC）、血糖、Hcy浓度，然后处死小鼠，取颈动脉、主动脉组织，进行HE染色、油红O染色、Masson染色、天狼猩红染色检测，免疫组化法检测IL-6，MMP-9的表达。
结果：
1.血脂：
1.1血清TC：各组与对照组比较血清TC的浓度均显著升高，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组与模型组比较血清TC的浓度均有显著降低，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组降低血清TC浓度的作用优于低剂量组，两组比较具有统计学差异（P＜0.05）。
1.2血清HDL：各组间相比较血清HDL浓度变化趋势不明显，均无显著的统计学差异（均P＞0.05）。
1.3血清LDL：各组与对照组比较血清LDL的浓度均显著升高，具有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组与模型组比较血清LDL均明显降低，具有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组降低血清LDL浓度的作用优于大蒜素低剂量组，具有显著统计学差异（P＜0.01）。
1.4血清TG：模型组、大蒜素低剂量组与对照组比较血清TG浓度均有显著升高，均有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组血清TG浓度比对照组略有降低，但无显著统计学差异（P＞0.05）；大蒜素低剂量组血清TG浓度比模型组有降低，但无显著统计学差异（P＞0.05）；大蒜素高剂量组血清TG浓度比模型组明显降低，具有显著统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高剂量组血清TG浓度比大蒜素低剂量组明显降低，具有显著统计学差异（P＜0.01）。
2.血清Hcy：模型组与对照组比较血清Hcy浓度显著升高，具有显著统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组与对照组比较，血清Hcy均无统计学差异（均P＞0.05）；大蒜素高、低剂量组与模型组比较血清Hcy浓度显著降低，均有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组血清Hcy比较，无显著统计学差异（P＞0.05）。
3.血糖：模型组小鼠血糖在实验期间一直维持高血糖状态（≥16.7mmol/L），与对照组相比，具有显著的统计学差异（P＜0.01），大蒜素高、低剂量组小鼠的血糖于干预2周后出现下降，与模型组相比血糖均明显降低，均有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组血糖较低剂量组明显降低，具有显著统计学差异（P＜0.01）。
4.体重：与对照组相比，模型组与大蒜素高、低剂量组小鼠均表现体重明显下降，均有显著的统计学差异（均P＜0.01）；模型组小鼠体重保持下降趋势，大蒜素高、低剂量组小鼠于灌胃后体重均出现回升。
5.组织病理形态学结果
5.1颈动脉组织HE染色
对照组（a）细胞整齐有序、形态清晰、结构完整，管腔狭窄Ⅰ级，斑块面积＜40%（22.16±6.07），脂核小，纤维帽厚，斑块稳定；模型组（b）细胞排列紊乱、形态模糊、结构不完整，管腔狭窄Ⅳ级，斑块面积＞40%（92.81±1.02），脂核较大，纤维帽薄，可见大量泡沫细胞、脂质结晶，斑块极不稳定；大蒜素低剂量组（c）较模型组细胞排列轻度紊乱、形态轻度模糊、结构轻度完整，管腔狭窄Ⅱ级，斑块面积＞40%（42.48±0.98），脂核偏大，纤维帽略薄，可见泡沫细胞，斑块轻度不稳定；大蒜素高剂量组（d）细胞排列较整齐、形态较清晰、结构较完整,管腔狭窄Ⅱ级，斑块面积＜40%（38±0.44），脂核小，纤维帽厚，斑块稳定。
5.2大体油红O法检测糖尿病小鼠主动脉斑块负荷
对照组(a)主动脉斑块负荷较轻，模型组(b)主动脉斑块负荷非常严重，此糖尿病小鼠模型极易发生动脉粥样硬化不稳定斑块。大蒜素低剂量组(c)主动脉斑块负荷略严重，大蒜素高剂量组(d)主动脉负荷明显减轻。
5.3颈动脉组织油红O染色结果
模型组(b)的脂质含量与对照组(a)相比明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)的脂质含量与模型组相比均明显降低，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组的脂质含量与低剂量组相比明显降低，具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
5.4颈动脉组织MASSON染色结果
模型组(b)与对照组(a)相比胶原纤维明显减少，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)与模型组相比胶原纤维明显增加，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组胶原纤维明显高于低剂量组，两组比较具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
5.5颈动脉组织天狼猩红染色结果
对照组(a)斑块胶原含量多，以Ⅰ型胶原纤维为主，斑块稳定；模型组(b)斑块极不稳定，其胶原含量明显降低，与对照组相比Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值明显降低，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素低剂量组(c)斑块胶原含量较模型组增多，Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高剂量组(d)斑块相对稳定，其胶原含量较模型组增多，以Ⅰ型胶原为主，Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值与模型组、大蒜素低剂量组相比均明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01，P＜0.05）。
5.6免疫组化结果
5.6.1IL-6模型组(b)与对照组(a)相比IL-6表达量明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)与模型组相比IL-6表达量均明显降低，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组IL-6表达量明显低于低剂量组，两组比较具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
5.6.2MMP-9模型组(b)与对照组(a)相比MMP-9表达量明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)与模型组相比MMP-9表达量明显降低，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高剂量组MMP-9表达量明显低于低剂量组，两组比较具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
结论：
1.8周龄雄性ApoE-/-小鼠腹腔注射STZ后，能成功诱发糖尿病，与人类的糖尿病状态基本类似。ApoE-/-小鼠在糖尿病状态下，促进动脉粥样硬化的发生与发展，加速不稳定斑块的形成。
2.糖尿病ApoE-/-小鼠的血脂（TG、LDL、TC）、血糖、Hcy浓度显著升高，体重明显下降，大蒜素干预能有效降低血脂（TG、LDL、TC）、血糖、Hcy的浓度，抑制血管内皮糖脂代谢紊乱的发生，减少动脉粥样硬化发生的危险因素。
3.ApoE-/-小鼠的糖尿病状态，降低动脉粥样硬化斑块内Ⅰ/Ⅲ型胶原比值及胶原含量，降低了斑块稳定性；大蒜素干预后能有效升高粥样硬化斑块内Ⅰ/Ⅲ型胶原比值及胶原含量，减少动脉粥样硬化斑块的易损性，稳定粥样硬化不稳定斑块，并具有量效关系。
4.糖尿病ApoE-/-小鼠的IL-6、MMP-9表达量明显升高。大蒜素干预能够有效抑制IL-6、MMP-9的活性及其表达。
通过制作糖尿病ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型，采用大蒜素进行干预，研究大蒜素对该动物模型的干预作用及其作用机制，探讨大蒜素在保护血管内皮作用机制中与糖脂代谢紊乱、氧化应激反应、炎症反应的相关性。为临床防治糖尿病大血管病变提供实验支撑。
方法：
选8周龄ApoE-/-雄性小鼠80只，体重25±5g。随机分为对照组（n=20）、实验组（n=60），对照组不做任何处理，普通饲料喂养；实验组将先后通过腹腔注射STZ、颈动脉套管、含3%蛋氨酸高脂饮食，制作糖尿病动脉粥样硬化小鼠动物模型，造模后适应性喂养1周。将糖尿病小鼠分为模型组（双蒸水，0.15ml/d，n=20）、大蒜素低剂量组（大蒜素，10mg/kg，0.15ml/d，n=20）、大蒜素高剂量组（大蒜素，20mg/kg，0.15ml/d，n=20），模拟药物的防治作用，于灌胃8周后，留取血样本，测定血脂（TG、LDL、TC）、血糖、Hcy浓度，然后处死小鼠，取颈动脉、主动脉组织，进行HE染色、油红O染色、Masson染色、天狼猩红染色检测，免疫组化法检测IL-6，MMP-9的表达。
结果：
1.血脂：
1.1血清TC：各组与对照组比较血清TC的浓度均显著升高，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组与模型组比较血清TC的浓度均有显著降低，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组降低血清TC浓度的作用优于低剂量组，两组比较具有统计学差异（P＜0.05）。
1.2血清HDL：各组间相比较血清HDL浓度变化趋势不明显，均无显著的统计学差异（均P＞0.05）。
1.3血清LDL：各组与对照组比较血清LDL的浓度均显著升高，具有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组与模型组比较血清LDL均明显降低，具有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组降低血清LDL浓度的作用优于大蒜素低剂量组，具有显著统计学差异（P＜0.01）。
1.4血清TG：模型组、大蒜素低剂量组与对照组比较血清TG浓度均有显著升高，均有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组血清TG浓度比对照组略有降低，但无显著统计学差异（P＞0.05）；大蒜素低剂量组血清TG浓度比模型组有降低，但无显著统计学差异（P＞0.05）；大蒜素高剂量组血清TG浓度比模型组明显降低，具有显著统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高剂量组血清TG浓度比大蒜素低剂量组明显降低，具有显著统计学差异（P＜0.01）。
2.血清Hcy：模型组与对照组比较血清Hcy浓度显著升高，具有显著统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组与对照组比较，血清Hcy均无统计学差异（均P＞0.05）；大蒜素高、低剂量组与模型组比较血清Hcy浓度显著降低，均有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高、低剂量组血清Hcy比较，无显著统计学差异（P＞0.05）。
3.血糖：模型组小鼠血糖在实验期间一直维持高血糖状态（≥16.7mmol/L），与对照组相比，具有显著的统计学差异（P＜0.01），大蒜素高、低剂量组小鼠的血糖于干预2周后出现下降，与模型组相比血糖均明显降低，均有显著统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组血糖较低剂量组明显降低，具有显著统计学差异（P＜0.01）。
4.体重：与对照组相比，模型组与大蒜素高、低剂量组小鼠均表现体重明显下降，均有显著的统计学差异（均P＜0.01）；模型组小鼠体重保持下降趋势，大蒜素高、低剂量组小鼠于灌胃后体重均出现回升。
5.组织病理形态学结果
5.1颈动脉组织HE染色
对照组（a）细胞整齐有序、形态清晰、结构完整，管腔狭窄Ⅰ级，斑块面积＜40%（22.16±6.07），脂核小，纤维帽厚，斑块稳定；模型组（b）细胞排列紊乱、形态模糊、结构不完整，管腔狭窄Ⅳ级，斑块面积＞40%（92.81±1.02），脂核较大，纤维帽薄，可见大量泡沫细胞、脂质结晶，斑块极不稳定；大蒜素低剂量组（c）较模型组细胞排列轻度紊乱、形态轻度模糊、结构轻度完整，管腔狭窄Ⅱ级，斑块面积＞40%（42.48±0.98），脂核偏大，纤维帽略薄，可见泡沫细胞，斑块轻度不稳定；大蒜素高剂量组（d）细胞排列较整齐、形态较清晰、结构较完整,管腔狭窄Ⅱ级，斑块面积＜40%（38±0.44），脂核小，纤维帽厚，斑块稳定。
5.2大体油红O法检测糖尿病小鼠主动脉斑块负荷
对照组(a)主动脉斑块负荷较轻，模型组(b)主动脉斑块负荷非常严重，此糖尿病小鼠模型极易发生动脉粥样硬化不稳定斑块。大蒜素低剂量组(c)主动脉斑块负荷略严重，大蒜素高剂量组(d)主动脉负荷明显减轻。
5.3颈动脉组织油红O染色结果
模型组(b)的脂质含量与对照组(a)相比明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)的脂质含量与模型组相比均明显降低，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组的脂质含量与低剂量组相比明显降低，具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
5.4颈动脉组织MASSON染色结果
模型组(b)与对照组(a)相比胶原纤维明显减少，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)与模型组相比胶原纤维明显增加，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组胶原纤维明显高于低剂量组，两组比较具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
5.5颈动脉组织天狼猩红染色结果
对照组(a)斑块胶原含量多，以Ⅰ型胶原纤维为主，斑块稳定；模型组(b)斑块极不稳定，其胶原含量明显降低，与对照组相比Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值明显降低，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素低剂量组(c)斑块胶原含量较模型组增多，Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高剂量组(d)斑块相对稳定，其胶原含量较模型组增多，以Ⅰ型胶原为主，Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值与模型组、大蒜素低剂量组相比均明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01，P＜0.05）。
5.6免疫组化结果
5.6.1IL-6模型组(b)与对照组(a)相比IL-6表达量明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)与模型组相比IL-6表达量均明显降低，具有显著的统计学差异（均P＜0.01）；大蒜素高剂量组IL-6表达量明显低于低剂量组，两组比较具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
5.6.2MMP-9模型组(b)与对照组(a)相比MMP-9表达量明显升高，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高(d)、低剂量组(c)与模型组相比MMP-9表达量明显降低，具有显著的统计学差异（P＜0.01）；大蒜素高剂量组MMP-9表达量明显低于低剂量组，两组比较具有显著的统计学差异（P＜0.01）。
结论：
1.8周龄雄性ApoE-/-小鼠腹腔注射STZ后，能成功诱发糖尿病，与人类的糖尿病状态基本类似。ApoE-/-小鼠在糖尿病状态下，促进动脉粥样硬化的发生与发展，加速不稳定斑块的形成。
2.糖尿病ApoE-/-小鼠的血脂（TG、LDL、TC）、血糖、Hcy浓度显著升高，体重明显下降，大蒜素干预能有效降低血脂（TG、LDL、TC）、血糖、Hcy的浓度，抑制血管内皮糖脂代谢紊乱的发生，减少动脉粥样硬化发生的危险因素。
3.ApoE-/-小鼠的糖尿病状态，降低动脉粥样硬化斑块内Ⅰ/Ⅲ型胶原比值及胶原含量，降低了斑块稳定性；大蒜素干预后能有效升高粥样硬化斑块内Ⅰ/Ⅲ型胶原比值及胶原含量，减少动脉粥样硬化斑块的易损性，稳定粥样硬化不稳定斑块，并具有量效关系。
4.糖尿病ApoE-/-小鼠的IL-6、MMP-9表达量明显升高。大蒜素干预能够有效抑制IL-6、MMP-9的活性及其表达。