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糖肽、糖蛋白的分离富集是糖蛋白质组学研究的重要前提,目前相关分离技术已有很多文献报道,以4-巯基苯硼酸为亲和配体的报道主要是将其搭载于磁性纳米材料表面,完成亲和孵育之后利用酸性洗脱,从而将糖肽、糖蛋白从材料表面释放,但目前报道的洗脱条件不一,甚至用了对人体有害的有机试剂,过酸性的洗脱难免会对目标糖肽、糖蛋白造成结构上的影响,而且也限制了部分对酸性敏感材料的运用。本文巧妙的构建了同时具备二硫键还原敏感断键的苯硼酸功能化磁性纳米颗粒,通过对二硫键温和的断键,从而使富集的糖肽、糖蛋白得到特异性释放,从而达到特异性分离纯化糖肽、糖蛋白的目的,减少了非糖蛋白的干扰也提高了对糖肽、糖蛋白的分离富集效率。本文主要研究内容包括以下两个方面: 第一部分,苯硼酸功能化磁性纳米微粒的制备,首先通过溶剂热法合成出粒径均一、分散良好的Fe3O4磁核,粒径为210nm,磁饱和值为47.8emu/g,随后通过Stober法对磁核进行包硅,从而提高磁核的生物相容性和稳定性,粒径为310nm,随后使用巯基硅烷偶联剂对Fe3O4@SiO2进行初步修饰,制备出巯基化磁性纳米微球,其表面巯基含量为31.05nM/mg最后通过两次巯基-二硫键交换反应将亲和配基4-巯基苯硼酸以二硫键的形式引入到磁性纳米材料表面,并通过红外、热失重等一系列表征手段对其进行表征,并通过对苯硼酸功能化磁性纳米颗粒的断键实验证明苯硼酸功能化磁性纳米微粒具有良好的还原敏感断键性能。 第二部分,苯硼酸功能化磁性纳米颗粒对糖肽、糖蛋白的分离、富集,通过蛋白吸附实验初步得出苯硼酸功能化磁性纳米颗粒对糖蛋白结合的特异性,蛋白吸附动力学实验更加证明了苯硼酸对糖蛋白结合的动力学特性。茚三酮显色法和MALDI-TOF质谱检测结果表明苯硼酸功能化磁性纳米颗粒对糖肽的特异富集和温和的还原敏感断键的特性,最后对实际样本鸡蛋清和人血清中糖蛋白的富集实验更加证明了苯硼酸功能化磁性纳米颗粒的实用性和优异的断键分离性能。