【摘 要】
：
背景:长期大量饮酒导致的酒精相关性性肝病（ALD）已经成为全球最普遍的一种肝病类型。炎症在ALD的发展历程中起到最核心的作用。而在炎症反应中,肝脏中活化的库否（kupffer）细胞会释放大量促炎细胞因子和趋化因子,细胞因子会加重氧化应激反应和肝脏炎症,从而导致肝损伤会进一步的恶化。机体在受到乙醇等外界因素刺激后,细胞外核苷酸UDP在会大量释放,并通过激活相应的P2Y受体促使免疫细胞趋化和细胞因子的
【基金项目】
：
国家自然科学基金资助,编号:81970518；
论文部分内容阅读
背景:长期大量饮酒导致的酒精相关性性肝病（ALD）已经成为全球最普遍的一种肝病类型。炎症在ALD的发展历程中起到最核心的作用。而在炎症反应中,肝脏中活化的库否（kupffer）细胞会释放大量促炎细胞因子和趋化因子,细胞因子会加重氧化应激反应和肝脏炎症,从而导致肝损伤会进一步的恶化。机体在受到乙醇等外界因素刺激后,细胞外核苷酸UDP在会大量释放,并通过激活相应的P2Y受体促使免疫细胞趋化和细胞因子的释放影响炎症的进程。P2Y受体家族中嘌呤能P2Y6受体（P2Y6）是一种典型的G蛋白偶联的胞外核苷酸受体,可被核苷酸UDP选择性激活促使Ca2+向细胞内聚集,进而介导一系列信号通路的变化。综上,我们探究P2Y6是否可以成为治疗酒精相关性脂肪性肝炎的一个潜在的靶点。目的:（1）探究UDP介导的P2Y6在酒精相关性脂肪性肝炎中表达的变化及作用;（2）探究沉默或过表达P2Y6后对酒精相关性脂肪性肝炎的影响及可能存在的机制;方法:（1）体内实验:通过连续喂养酒精液体饲料加急性酒精灌胃的方法建立酒精相关性脂肪性肝炎小鼠模型。随机将小鼠分为六组,每组10只,即对照组（Pair-fed）、酒精组（Et OH-fed）、对照+MRS2578组（P2Y6特异性抑制剂,3mg/kg）、酒精+MRS2578组（3mg/kg）、对照+UDP组（P2Y6特异性激动剂,10mg/kg）和酒精+UDP组（10mg/kg）。建模结束后收集肝脏、血清等用于后续实验。HE染色和BODIPY染色法分别观察肝脏损伤和脂质堆积情况;酶标仪比色法检测血清中ALT/AST/T-CHO/TG水平;免疫组化染色观察肝脏组织中巨噬细胞浸润情况;ELISA和（或）Western blot和（或）RT-q PCR检测P2Y6和炎症因子（TNF-ɑ,IL-1β和IL-6）的表达情况;流式细胞术检测AML-12细胞的凋亡率。（2）体外实验:采用80m M乙醇诱导RAW264.7细胞活化以建立体外细胞炎症模型。待炎症模型建立后（乙醇刺激RAW264.7细胞12h）,提取RAW264.7细胞的上清液用于培养AML-12细胞24h。在模型建立过程中,加药组转染P2Y6-si RNA用于沉默P2Y6以及转染p EX3-P2Y6用于过表达P2Y6,而转染Scrambled-si RNA和P2Y6-NC则分别用于对照。免疫荧光染色观察P2Y6和phospho-p38 MAPK（p-p38 MAPK）的表达情况;ELISA和（或）Western blot和（或）RT-q PCR检测P2Y6,p-p38 MAPK和炎症因子（TNF-ɑ,IL-1β和IL-6）的表达情况;Western blot检测凋亡相关蛋白;流式细胞术检测AML-12细胞的凋亡率。结果:（1）体内实验:与对照组相比,酒精组小鼠的肝脏有明显的脂滴和炎性细胞浸润,血清ALT/AST/T-CHO/TG水平以及炎症因子（TNF-ɑ,IL-1β和IL-6）水平明显上升。这表明酒精相关性脂肪性肝炎小鼠模型的成功建立。另外,相比于对照组,酒精组中P2Y6的m RNA和蛋白水平显著上调。与酒精组相比,当给予腹腔注射MRS2578后,其肝脏病理切片染色显示脂滴和炎性细胞浸润显著减少且血清学指标中ALT/AST/T-CHO/TG水平以及炎症因子水平明显下降;而给与腹腔注射外源性UDP后各项指标则与上述的结果相反。（2）体外实验:与未受乙醇刺激的细胞比较,用80m M乙醇刺激RAW264.7细胞12h后,炎症因子的表达水平明显上升,表明体外炎症模型的成功建立。此外,在这种刺激条件下P2Y6的表达水平也显著升高。在活化的RAW264.7细胞中转染P2Y6-si RNA沉默P2Y6后,细胞上清液中炎症因子（TNF-ɑ,IL-1β和IL-6）水平下降,进一步研究发现,随着P2Y6表达的下调,细胞内钙离子浓度降低,p-p38 MAPK表达水平下降,此外,用转染P2Y6-si RNA的RAW264.7细胞上清液培养AML-12细胞后,AML-12细胞凋亡率显著下降;而在乙醇刺激的RAW264.7细胞中过表达P2Y6后各项检测结果则与上述结果呈现相反的趋势。结论:（1）抑制P2Y6的表达可以减少乙醇诱导巨噬细胞中炎症因子的产生;（2）UDP-P2Y6通过介导钙离子的内流,继而激活p38 MAPK信号通路诱导炎症反应。
其他文献
【研究背景】肿瘤干细胞是肿瘤细胞的一个亚群,又称肿瘤起始细胞,在包括血癌和实体瘤在内的大多数癌症中均有发现。到目前为止,几乎所有的实体瘤都能分离到肿瘤干细胞。肿瘤干细胞具有自我更新、维持干细胞特性和分化为多种类型癌细胞的能力,在肿瘤发生过程中、治疗耐药以及治疗后的复发中发挥着重要作用。目前普遍认为肿瘤干细胞的生物学来源是突变的成体干细胞或去分化的癌细胞。此外,上皮间充质转化（EMT）以及其反向过程
镁合金铸件作为航空航天、汽车等领域广泛应用的工程材料,在减重和降低成本等方面起着重要的作用,但在铸造和服役过程中容易产生缺陷,为了节约成本,需要对存在缺陷的铸造镁合金进行修复处理,常见的修复过程需要人工的参与,主要存在修复精度低、效率差、质量无法保证等问题。针对于以上问题,本文搭建了针对于镁合金铸件修复的机器人电弧增材修复平台,对修复过程中的三维模型重构、分层切片、路径规划和机器人仿真等技术进行了
覆锡工艺是一种常见的表面处理方式,经该工艺获得的表面具有防腐、防水的特性,且有较好的电学性能。目前国内外常用电镀的方式对金属材料表面覆锡,而对于非金属材料,尚未有能实现大面积覆锡的设备。本文设计的自动烫覆锡膜设备能够将锡料熔化至液态,并直接烫覆在云母片等非金属材料基底表面,一次性实现大面积覆锡,具有广泛的应用前景。本文首先对自动烫覆锡膜设备的机械结构、电气硬件和控制系统进行总体设计。通过分析其成膜
2020年11月,《区域全面经济伙伴关系协定》（RCEP）伴随着第四次区域全面经济伙伴关系协定领导人会议正式签订。这是当前世界上人口最多、经济贸易规模最大的贸易协定,RCEP成员国也在世界贸易中占据非常重要的地位,这一协定的签订将对世界贸易产生深远影响。通过测算中国与RCEP成员国的贸易便利化指数,并利用贸易便利化指数,探究其对贸易效应的影响,这对在贸易便利化角度提升对外贸易有重要的价值,对中国今
随着我国不断深化改革扩大开放,金融市场的规模也在不断扩大,截止到2021年,债券市场达到空前的规模。市场投资者和市场监管部门都不愿意看到债券违约事件的发生,然而债券违约现象逐年增多却又是一个不争的事实。公司债作为企业信用债的代表,具有发行额度高、发行数量大、发行品种多等特征。因此对公司债券违约进行研究有助于为债券市场的稳定提供帮助,同时,信息技术的发展也使得对公司债券违约进行深入研究成为可能。本文
2024铝合金因其优良的综合性能而广泛应用于航空航天等现代工业中。由于其高腐蚀敏感性限制了2024铝合金的应用和发展。使用环境引起的腐蚀过程中产生的氢原子会进入铝合金内部,导致并严重影响其组织、力学性能、腐蚀性能。同时,国内外关于氢对铝合金的影响研究较少,基础理论不足。因此,探究铝合金中氢对组织与性能的影响、揭示铝合金氢损伤机制,对于控制关键结构件的氢损伤、完善相关理论有工程意义和理论意义。因此,
生姜是姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的新鲜根茎,是一种较为常见中药,多用于风寒感冒,胃寒呕吐,寒痰咳嗽,鱼蟹中毒;它同时也是传统的调味品。6-姜酚（6-gingerol）是生姜的主要活性成分,现代药理研究证明6-姜酚具有多种生物学活性,如抗炎、保肝利胆以及抗肿瘤等。研究还发现6-姜酚对非酒精诱导肝损伤小鼠具有保护作用。铜陵白姜是稀有的优良生姜地方品种,“铜陵八宝”之一
背景和目的酒精相关性肝病（Alcohol-associated liver disease,ALD）正逐渐发展为导致临床上肝脏相关疾病发病率、死亡率升高以及成为肝移植指征的重要原因之一。长期过量的酒精摄入会引起肝脏脂肪变性、炎症、氧化应激等,造成肝细胞损伤,更有甚者会发展为肝纤维化、肝硬化及肝细胞癌。然而,目前尚没有针对ALD的有效治疗方案,因此,了解ALD的发病过程的潜在机制非常重要。核受体辅助
炎症性肠病（IBD）是一种由免疫系统介导的慢性非传染性疾病,具有高发病率和高复发率的特点。IBD包括克罗恩病和溃疡性结肠炎两种临床表现,其特征是胃肠道内不受控制的慢性炎症、上皮屏障破坏和微生物种群失调。白介素-10（IL-10）是一种多细胞来源的多功能细胞因子,可以通过多种机制促进免疫稳态,包括抑制先天免疫细胞产生的促炎细胞因子和促进调节性T细胞功能。遗传学研究发现,IL-10或IL-10受体基因
随着可持续发展理念在世界范围内受到重视,全球ESG投资规模的增加,ESG基金在我国金融市场上受关注的程度也越来越高。然而,ESG基金在中国花了较长时间逐渐起步,而且仍然没有得到普遍认可。因此,研究ESG基金在我国的绩效表现、绩效影响因素及绩效持续性至关重要。首先,本文将国内及国外目前对ESG基金的研究情况进行了总结分析,并阐述了目前我国ESG基金研究中存在的部分局限性。其次,描述了ESG基金、基金