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背景脂肪细胞胰岛素抵抗是慢性非传染性疾病发病的重要环节。研究显示EPA、DHA具有调节脂肪细胞胰岛素抵抗的潜能,并且可能具有作用差异,但是目前关于EPA和DHA对脂肪细胞的胰岛素抵抗的调节作用的确切机制尚不明确,可能与脂肪细胞和巨噬细胞上的GPR120、PPARγ有关。目的与意义本研究拟观察EPA、DHA能否直接调节或通过巨噬细胞间接调节脂肪细胞胰岛素抵抗,并进一步探讨其中机制为合理摄入EPA和DHA,防治慢性非传染性疾病提供新的理论依据。方法地塞米松或TNF-α建立脂肪细胞胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法测细胞糖消耗量,Western blot法测胰岛素信号通路分子(IRS 1、PI3K、p-AKT(Ser473)、AKT、GLUT4)蛋白量。100μM EPA/DHA 加或不加 10μM AH7614/GW9662(GPR120 抑制剂/PPARy拮抗剂)处理脂肪细胞胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法测糖消耗量,Western blot测GPR120、PPARγ、胰岛素信号通路分子、MCP-1,Transwell测脂肪细胞对RAW264.7巨噬细胞的募集。100μM EPA/DHA 加或不加 10μM AH7614/GW9662 处理 RAW264.7 巨噬细胞炎症模型,RT-PCR 测 GPR120、PPARγ、CD206、CD301、TNF-α、MCP-1,Western blot 测 GPR120、PPARγ、TNF-α、iNOS,ELISA 测 IL-10、TNF-α。RAW264.7巨噬细胞经处理后换空白完全培养液培养24小时,取上清处理脂肪细胞,葡萄糖氧化酶法测糖消耗量,Western blot法测胰岛素信号通路分子蛋白量。结果EPA、DHA直接改善脂肪细胞胰岛素抵抗(1)10ng/mL TNF-α处理脂肪细胞48小时后,细胞糖摄取量下降(P<0.01),胞内IRS1、PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达下降(P<0.05或P<0.01),成功建立胰岛素抵抗模型。(2)100μM EPA、DHA均能改善TNF-α诱导的糖摄取下降(P<0.01或P<0.05)及胞内 IRS1、PI3K、p-AKT、GLUT4 蛋白表达下降(P<0.01)。(3)100μM EPA 能改善 TNF-α 诱导的 PPARγ 表达下降(P<0.01);100μM DHA能改善TNF-α诱导的GPR120和PPARγ表达下降(P<0.01)。(4)GPR120抑制剂AH7614能阻遏DHA对GPR120的表达促进从而抑制脂肪细胞糖摄取及胞内PPARγ、IRS1、PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。PPARγ拮抗剂GW9662能抑制EPA和DHA对PPARy的表达促进从而抑制脂肪细胞糖摄取及胞内IRS1、p-AKT、GLUT4蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。EPA、DHA通过巨噬细胞预防脂肪细胞胰岛素抵抗(1)EPA、DHA均能预防脂肪细胞胰岛素抵抗引起的巨噬细胞募集(P<0.01),其中DHA作用更强(P<0.01);加入GPR120抑制剂或PPARγ拮抗剂后,前述作用降低(P<0.01)。(2)EPA、DHA均能提高LPS处理后巨噬细胞GPR120、PPARγ、抗炎标志物CD206、IL-10含量,降低促炎标志物TNF-α、NO含量(P<0.05或P<0.01);使用GPR120抑制剂或PPARγ拮抗剂后,前述作用降低(P<0.05或P<0.01)。(3)EPA、DHA均能预防巨噬细胞炎症引起的脂肪细胞糖摄取下降、p-AKT下降(P<0.05或P<0.01),其中DHA作用更强(P<0.01)。DHA还能预防巨噬细胞炎症引起的脂肪细胞IRS1、PI3K、GLUT4下降(P<0.01),加入GPR120抑制剂或PPARγ拮抗剂后,前述作用降低(P<0.05或P<0.01)。结论(1)DHA通过GPR120及GPR120/PPARγ信号通路直接增强脂肪细胞胰岛素敏感性,EPA通过PPARγ信号通路直接改善脂肪细胞胰岛素敏感性。(2)EPA、DHA通过巨噬细胞上的GPR120/PPARγ信号通路降低巨噬细胞炎症反应从而预防脂肪细胞胰岛素抵抗,其中DHA作用更强。