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肺癌已是目前我国乃至全球范围内导致癌相关死亡人数最多的恶性肿瘤疾病,这些患者中超过85%为非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC),其中最常见的两种亚型是腺癌(Adenocarcinoma, ADC)和鳞状细胞癌(Squamous cell carcinoma, SCC,其发病隐匿,大部分患者被诊断时已处于中晚期,手术作为最常用的,也是目前最有效的治疗手段,但对于中晚期患者的疗效及预后改善并不理想,且有些患者确诊时已无法接受手术治疗。而其他的传统治疗手段,如放射性疗法、化学疗法等均存在较大副作用,治疗效果也并不尽如人意,这就需要去寻找新的治疗手段。近年来针对肿瘤的基因治疗取得诸多突破,也面临一些问题,由于现阶段基因治疗的载体系统在人体内既不能特异性转染所有的肿瘤细胞,也不能使治疗基因在肿瘤内高效表达,所以治疗基因的生物学效应难以得到发挥,导致其抗肿瘤能力并未达到预期效果。并且肿瘤的发生是包含多种基因改变的多步骤过程,单独调节某一基因难以消灭肿瘤。因此,寻求能对肺癌起到高效抑制作用的抑癌基因和靶向性强、安全性好、表达效率高的载体就成为了基因治疗策略需要解决的问题。多项研究表明肝激酶Bl(Liver kinaseB1, LKB1)及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)与NSCLC的发生发展密切相关,其基因的缺失或下调会诱使NSCLC发生并极大促进其发病进程。本研究应用免疫组织化学法(IHC)检测了LKB1及PTEN两抑癌基因在NSCLC患者中的表达情况并结合临床信息分析其与NSCLC发生发展的潜在关系；应用免疫细胞化学法(ICC)、qPCR及western blot方法检测了A549,NCI-H23、 NCI-H157.XWLC-05四株NSCLC细胞系和一株SCLC细胞系NCI-H446中LKB1及PTEN的表达水平；通过AdMax系统构建重组腺病毒过表达载体Ad-LKB1,将目的基因导入肺癌细胞并实现LKB1在肺癌细胞中的过表达,并在体外细胞水平通过CCK-8增殖活性检测及细胞划痕修复实验初步探究LKB1对肺癌细胞,尤其是非小细胞肺癌细胞增殖及迁移能力的影响。我们发现在所检测的74例NSCLC患者中,有35例为PTEN阳性表达(47.3%),另有52例为LKB1阳性表达(70.3%)；该两基因的表达水平与患者性别、年龄、肺癌的病理组织亚型等无显著差异(P>0.05),而与淋巴结转移、周围组织侵犯、临床分期等具有显著差异(P<0.05)；联合LKB1及PTEN表达水平与患者发病恶性程度分析发现,LKB1与PTEN共同表达水平越高,其肿瘤恶性程度越低(P<0.05)。在成功构建重组腺病毒载体Ad-LKB1后,我们发现在肺癌细胞内过表达LKB1基因,可以抑制肺癌细胞的增殖活性,且在表型为LKB1-/PTEN-的XWLC-05细胞中,抑制作用最为显著,而在表型为LKB1+PTEN+的NCI-H23细胞中,其增殖抑制作用相对较弱；在划痕修复实验中,相较于感染Ad-null的对照组细胞,感染Ad-LKB1的肺癌细胞的细胞迁移能力被显著抑制。本研究结果证实了LKB1及PTEN在NSCLC患者中存在一定的表达下调,且发现两者对于肺癌的恶性进展可能存在潜在的协同作用；通过体外细胞实验,初步证实了抑癌基因LKB1对肺癌细胞具有较强的抑制增殖及迁移作用。提示LKB1及PTEN可作为潜在的肺癌预后标志物；LKB1具有靶向治疗靶点的潜力,对应用于新型基因治疗方案提供了一定参考价值。对于LKB1抑制肺癌细胞活性具体分子机制及其与PTEN在肺癌中的协同作用还有待于进一步研究。