蓝莓花色苷提取纯化及生理功能研究

被引量 : 150次 | 上传用户:chenan110
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蓝莓是杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium.spp)植物,在我国有丰富的蓝莓资源。研究表明,蓝莓果中含有丰富的花色苷类物质,具有消除眼睛疲劳,保护视力,以及抗氧化、抗衰老、抗溃疡、抗炎和抗癌等生理功能和药用功能。本文通过比较4个品种蓝莓花色苷含量的差异,筛选出花色苷含量比较高的“圣云”蓝莓作为试验材料,对其花色苷进行系统的研究,以明确其生物活性,为更好地开发和利用蓝莓资源提供理论支持。本文通过溶剂法和酶法研究蓝莓花色苷的提取工艺;研究AB-8型大孔树脂对花色苷静态和动态纯化条件,并采用聚酰胺和硅胶柱层析对花色苷进一步纯化,用硅胶薄层色谱对花色苷的组分成分进行分离。用反相高效液相色谱/质谱对蓝莓花色苷进行分离和组成成分分析;研究了蓝莓花色苷的稳定性,并对其进行微胶囊化和分子修饰;通过化学模拟试验对蓝莓花色苷的体外抗氧化作用进行了系统评价;通过动物试验研究花色苷对高脂血症大鼠血脂、抗氧化及动脉硬化的影响并探讨其作用机制。主要研究结论如下:1.溶剂法提取蓝莓花色苷最佳条件为:60%乙醇,料液比为1g:15mL,提取时间120min,pH3.0,提取温度40℃,提取2次即可。圣云蓝莓果中花色苷的含量约为328.91mg/100g鲜果。2.一定量的纤维素酶使蓝莓花色苷提取量提高,而果胶酶未能提高花色苷提取量,增加果胶酶用量,花色苷提取量下降。两种酶复合处理花色苷提取量低于相同用量纤维素酶的花色苷提取量,两种酶无协同作用。纤维素酶提取蓝莓花色苷的最佳条件为:酶用量5mg/g,料液比1g:8mL,酶解时间60min,pH5.0,酶解温度为45℃,提取2次即可,2次累计提取量与水提法相比,提高49.35%。3.通过对10种大孔树脂的静态吸附解吸研究,发现AB-8型大孔树脂是一种比较理想的树脂,吸附率大,解吸率高,较适合蓝莓果中花色苷类成分的纯化。AB-8型大孔树脂对花色苷的吸附属多分子层吸附,静态吸附解吸条件为:吸附平衡时间为4h,解吸平衡时间2h,吸附平衡最适浓度为750mg/L,pH3.0时吸附能力比较强,用pH3.0的60%乙醇溶液作为解吸液,低温有利于AB-8型树脂的吸附,而高温则有利于该树脂的解吸。动态吸附解吸条件为:吸附和解吸流速1mL/min,上样液浓度3.0mg/mL,用5倍柱床体积的60%酸性乙醇作为洗脱液。经大孔树脂纯化后的蓝莓花色苷为紫黑色粉末,再经硅胶、聚酰胺柱层析,其色价分别为79.20,85.30。以硅胶G作为层析介质,通过用不同的展开剂分离蓝莓花色苷,分离效果比较好的是正丁醇-乙酸-水(4:1:5)和水-乙醇-正丁醇-乙酸乙酯(12:8:24:36)为展开剂。4.蓝莓花色苷在酸性缓冲液和甲醇溶液中的可见区最大吸收波长分别520nm,535nm,通过高效液相色谱/质谱分析,“圣云”蓝莓含有17种花色苷单体,分别是芍药色素3-半乳糖苷、飞燕草色素3-半乳糖苷、矢车菊色素3-半乳糖苷、矢车菊色素3-葡萄糖苷、牵牛花色素3-半乳糖苷、牵牛花色素3-葡萄糖苷、矢车菊色素3-阿拉伯糖苷、芍药色素3-葡萄糖苷、锦葵色素3-半乳糖苷、锦葵色素3-葡萄糖苷、锦葵色素3-阿拉伯糖苷、牵牛花色素3-阿拉伯糖苷、飞燕草色素3-葡萄糖苷、芍药色素3-乙酰半乳糖苷、锦葵色素3-乙酰半乳糖苷、芍药色素3-乙酰葡萄糖苷、锦葵色素3-乙酰葡萄糖苷。通过制备型高效液相色谱制备2种花色苷单体,经紫外、红外、质谱、核磁共振分析鉴定,样品1主要为锦葵色素3-半乳糖苷,样品2主要为锦葵色素3-葡萄糖苷。5.蓝莓花色苷属于水溶性色素。该花色苷在pH小于3.0条件下比较稳定,在60℃以下热稳定性较好,在短时间内有一定的耐高温能力。对光比较敏感,微波对其稳定性无不良影响。该花色苷耐氧化还原性差,抗坏血酸使花色苷稳定性下降,加速花色苷溶液的褪色。蔗糖和葡萄糖对蓝莓花色苷稳定性均无不良影响,高浓度的蔗糖和葡萄糖对其有不同程度的护色效果。苯钾酸钠对蓝莓花色苷稳定性具有良好作用。K+不能使花色苷的吸光度增加,对花色苷的稳定性也无明显影响;Mg2+、Ca2+、Cu2+、Al3+具有增色作用,对花色苷的稳定性无显著影响:高浓度Na+、Zn2+、Mn2+具有增色作用,而且能够增强花色苷的稳定性:Fe2+、Fe3+、Pb2+对花色苷具有破坏作用,使花色苷的稳定性下降,含Fe3+、Pb2+的花色苷溶液出现浑浊,有沉淀生成。6.以阿拉伯胶为壁材微胶囊化蓝莓花色苷的工艺条件为:芯材与壁材比3:197,固形物含量为20%,进风温度为180℃,出风温度为70℃。以β-环糊精-麦芽糊精-阿拉伯胶为壁材微胶囊化蓝莓花色苷的工艺条件为:芯材与壁材比3:97,β-环糊精:麦芽糊精为1:2,阿拉伯胶占总固形物的百分比为7.5%,固形物含量为20%。以大豆分离蛋白-麦芽糊精为壁材对蓝莓花色苷进行微胶囊化的工艺条件:大豆分离蛋白与麦芽糊精比为3:7,芯材:壁材为4:96,固形物含量为15%。乙基纤维素作为壁材微胶囊化蓝莓花色苷的工艺条件为聚乙二醇含量15%,芯材与壁材比1:19,固形物含量4%。微胶囊产品在模拟胃液环境中释放率比较高,在模拟胃液环境中停留60min后,释放率均达到90%以上。蓝莓花色苷微胶囊化和酰化后,花色苷的光和热稳定性提高。7.蓝莓花色苷具有抗油脂和抗脂质体氧化能力,而且抗脂质体氧化能力强于抗坏血酸。蓝莓花色苷具有较强的还原能力:蓝莓花色苷具有清除羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基和H2O2能力。8.与高脂模型组相比,灌胃蓝莓花色苷能显著降低大鼠血清的总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平和载脂蛋白ApoB含量,显著提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平和载脂蛋白ApoAⅠ含量,动脉硬化指数显著下降。与高脂模型组相比,灌胃蓝莓花色苷可以有效提高大鼠血清和肝脏总抗氧化能力,抗氧化酶SOD和GSH-Px活性显著提高,脂质过氧化物MDA含量显著下降。结果表明:蓝莓花色苷能够降低高脂血症大鼠血脂水平,改善血脂代谢,抑制脂质过氧化,可以有效的预防动脉硬化(AS)的发生和发展。
其他文献
20世纪60年代,世界著名心理学家、“记忆之父”东尼·博赞(Tony Buzan)首次提出“思维导图”这一概念,后广泛应用于商务、教学与生活各个领域之中,因其图文并茂、生动形象地展示大脑思维结构受到推崇,其潜在的教学价值也引起了我国广大教育工作者的关注与思考。思维导图作为一种全新的思维训练工具,以可视化的表达呈现有序的信息,操作方便,运用到阅读教学中能帮助学生快速梳理文本结构,能模拟大脑的神经系统
<正> 米勒链球菌(S.米勒)是口咽部、低胃肠道和阴道的共生菌,偶尔伴有深部感染。这种菌可出现α、β或γ溶血,而且显示有兰斯菲尔德型抗原的变异,尤其是F、C、C和少数的普通A
自上世纪90年代起,国内企业与外资企业针对我国上市公司的并购重组活动逐渐活跃起来,而随着2005年以来股权分置改革的顺利实施,我国证券市场的全流通时代指日可待,届时,我国
资源承载力是区域可持续发展的重要基础,任何区域的发展都要在资源承载力许可的范围内进行,否则区域发展将不可持续。当前,如何处理好资源与人口、环境和经济可持续发展之间
少数民族题材电影无疑是新中国电影史上一道特别的景观。它以异质多元的少数民族为表现对象,既是展现民族国家内部多元文化的重要纽带,也是社会主义中国构建政治共同体和文化
中上扬子地区区内地质构造现象复杂,尤其是中、新生代的复杂褶皱和逆冲推覆构造在该区的展布和组合格局是研究陆内造山活动的天然实例。地质构造的研究是突破整个华南大地构
慢性肺源性心脏病(chronic pulmonary heart disease,CPHD,简称慢性肺心病)是由于慢性支气管肺疾病,胸廓疾病或肺血管疾病引起肺循环阻力增加、肺动脉高压,进而引起右心室肥
本文首先分析了主控制系统的结构设计及功能实现,初步建立了各系统的数学模型。详细分析了各控制系统之间的逻辑关系和运行机理。本文开发了新型变桨距系统,并对其驱动控制部
目的:1.对人体颌面部进行巨微解剖及血管铸型,为临床整形美容术提供应用解剖参考依据。2.探讨人体颌面部血管数字化的方法,对颌面部血管及其周围结构的毗邻关系进行三维可视
目的评价合肥地区建筑工地农民工的生存质量状况,并探讨可能的影响因素;了解建筑工地农民工商业性行为和安全套使用、伤害等情况,为相关部门采取相应措施,提高该人群的生存质