论文部分内容阅读
本文以基因敲除方法研究志贺氏菌的功能基因,以RecA重组系统为基础,采用低拷贝自杀质粒pCVD442作为本敲除体系的重组载体,为了克服该质粒在进行分子克隆操作中的困难,将Gateway技术应用在敲除前期的重组质粒构建过程中,成功构建了福氏志贺菌2a型301株uhpT基因部分缺失的突变体MT,从而建立了在福氏志贺菌中进行定位插入或缺失突变的敲除技术平台。对突变株分别在培养基、细胞水平进行了功能检测。在普通LB培养基及TSB培养基中突变株与野生株的生长没有显著差异;突变株在U937细胞的胞内