松材线虫HOX基因的克隆及表达特性研究

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松材线虫病是由松材线虫引起的世界性检疫性病害,在我国严重发生。迄今为止,国内外对松材线虫开展了大量的研究,但在生殖发育方面,尚缺乏系统的研究。HOX家族是一类进化保守的发育调控基因,在胚胎发育和器官形成过程中具有重要的轴向调控作用。研究松材线虫HOX基因的表达调控机理,对于揭示松材线虫的生殖发育具有重要的意义,是亟待解决的科学问题之一。本研究通过对松材线虫HOX基因的克隆、RACE全长序列分析、功能区域蛋白空间结构预测、原位杂交和功能验证等研究,取得以下五个方面的结论:一是首次明确了松材线虫HOX基因家族包括5个成员,分别为lin-39、mab-5、ceh-13、egl-5和php-3基因;二是获得了松材线虫5个HOX基因的全长序列,并在Gene Bank登录,lin-39、mab-5、ceh-13、egl-5和php-3五个基因的登录号分别为KM891588、KM116504、KM116502、KM116503和KM116505;三是明确了松材线虫HOX基因在基因组上的共线性(co-linearity)前后轴(anteroposterior(A-P))排列顺序,依次为lin-39、mab-5、ceh-13、egl-5和php-3;四是预测了各基因功能区蛋白空间结构,其中lin-39、mab-5和ceh-13三个基因的功能区蛋白空间结构相同,且与egl-5和php-3基因存在一定的差异;五是明确了5个HOX基因在松材线虫不同发育时期和不同性别个体上的表达部位,即在松材线虫的成虫期,5个基因在雌雄虫的生殖器部位都有表达,php-3基因在尾部也有表达,在J4和J2期所有基因都不表达,在J3期,lin-39、mab-5、ceh-13和egl-5在身体大部都有表达,但php-3基因只在尾部表达,在卵期的表达部位差异较大;
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