典型环境内分泌干扰物对MCF-7细胞的增殖毒性及初步机理探讨

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雌激素类化合物是典型的环境内分泌干扰物(environmental endocrinedisrupting chemicals, EDCs),在低剂量下就具有较强的生殖及发育毒性,成为环境毒理学领域的关注热点之一。其中雌二醇(E2)、戊酸雌二醇(EV)、己烯雌酚(DES)、双酚A(BPA)、DEHP及其代谢产物MEHP被认为是典型雌激素类化合物,在水环境中广泛存在,受到人们的关注,但关于它们的联合毒性效应及作用机制仍需加强研究。本文运用经典的人类乳腺癌细胞MCF-7增殖实验,采用CCK8法测试了典型雌激素类化合物对MCF-7细胞增殖的单一毒性及不同实验设计下的联合毒性效应;并从雌激素受体和细胞内活性氧水平变化方面探讨了雌激素干扰物对MCF-7细胞增殖毒性作用途径;同时进行了黄浦江和苏州河沉积物有机提取物对MCF-7细胞增殖的复合毒性效应及对细胞内ROS水平的影响,主要结果如下:(1)E2、EV、DES、BPA促进了人类乳腺癌细胞MCF-7的增殖,而DEHP、MEHP对MCF-7细胞增殖没有影响;析因实验和等浓度配比两种实验设计研究DES和EV的二元混合物对MCF-7细胞的增殖效应均表现为加和效应或接近加和效应。(2)目标化合物E2、DES、BPA对MCF-7细胞的ER受体蛋白有一个明显的表达,说明它们可能是通过雌激素受体(ER)调节机制对MCF-7细胞增殖产生促进作用的。此外E2、EV和BPA都可调节MCF-7细胞内ROS水平,他们在诱导氧化应激的同时,又发挥着抗氧化性机制,使细胞内氧化还原水平处于动态平衡中;DES和DEHP对ROS水平影响不明显;DES、BPA、DEHP与EV联合作用没有改变这三种化合物单独作用时对细胞内ROS水平的影响。(3)黄浦江和苏州河沉积物的有机提取物对MCF-7细胞增殖的毒性测试结果显示,除个别点外,大部分样点均表现出不同程度的MCF-7细胞增殖的毒性效应,且呈剂量-效应依赖和时间-效应依赖关系。并对MCF-7细胞内ROS水平产生一定的影响。说明黄浦江、苏州河沉积物受到了有机污染物的污染,并且部分河段污染较严重,但具体是受到哪类污染物污染需要进一步进行化学分析确认。
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