灵芝孢子粉化学成分的研究

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灵芝孢子粉(Gaanoderma lucidum spore powder)是灵芝属真菌散发出来的孢子体。灵芝是一种药用真菌,早有历史记载其药用功效。近40年,灵芝广泛被用于如慢性支气管炎、高血脂症、高血压病、神经衰弱、肝炎等多种疾病的防治[1]。灵芝孢子粉是灵芝在其子实体发育成熟后,不断从菌管中弹射出孢子汇集而成。内含丰富的生物活性成分,其药用价值为灵芝子实体和菌丝体的数十倍,但是灵芝孢子具有双层壁,其双层壁限制了对其化学成分、生物活性成分的深入研究。随着技术的进一步发展,人们采用多种有效的方法对灵芝进行破壁,以便更好地对其进行研究。本文以灵芝孢子粉为研究对象,主要对其化学成分进行研究。首先,将灵芝孢子粉用甲醇溶液浸泡后加热回流提取3次,合并提取液,减压浓缩,既得灵芝孢子粉提取物浸膏,称重,后用适量的蒸馏水溶解制成混悬液,依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇1:1萃取,浓缩得各层萃取物,综合运用多种层析分离方法,如硅胶柱层析,反相硅胶柱层析,高,中压制备色谱,主要对石油醚、乙酸乙酯这两个萃取层进行进一步的分离纯化,最终分离出10个单体化合物。其中从石油醚层萃取物分离出4个化合物,从乙酸乙酯层萃取物分离出6个化合物,根据物理化学性质及综合运用谱图数据及与标准品薄层板对照最终解析出10种化合物的结构,它们分别为:油酸(Oleicacid)(1),麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(Ergosterol-7,22-diene-3ββ-ol)(2),β-谷甾醇(3),酒酵母甾醇(Cerevisterol)(4),β-胡萝卜苷(5),α-生育酚(α-Tocopherol)(6),(2R,3S)-2.3-dihydro-2-(4’-hydroxy-3’-methoxy-phenyl)-3-hydroxylmethyl-7-methox y-5-benzofuran-propapol-4’-O-/β-glucopyranoside(7),甘露醇(8),β-D-fructofuranosy-α-D-Allopyranoside(9),蔗糖(10)。此外,为了更全面的了解灵芝孢子粉药理作用,我们针对灵芝孢子粉甲醇提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用进行了实验,初步确定灵芝孢子粉对谷氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)有一定的的药理作用,并通过对小鼠脏组织的石蜡切片的HE染色发现其对四氯化碳急性肝损伤有一定的保护作用。最后,对灵芝孢子粉的石油醚层萃取部分利用GC-MS进行挥发性成分的分析,结果中一共得到75种相识度85%以上的成分,其中多为脂肪族化合物,脂肪酸和脂肪醇,与文献[2-4]中灵芝孢子油GC-MS结果进行对比后发现,本文的GC-MS结果得到了灵芝孢子粉中的挥发成分更多,更全面。
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