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研究背景与目的:胃癌是常见的消化道肿瘤,其发病率高,预后差。近年来,人们研究发现长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤的发展进程中作用显著,我们课题组前期研究发现lncRNA AK023391(AK023391)在胃癌组织中高表达,而氧化苦参碱具有良好的抗胃癌作用,因此本研究通过探讨AK023391在胃癌组织及细胞系中的表达,并观察其对胃癌细胞生物学行为的影响。进一步探讨AK023391在胃癌细胞中的作用机制,并探讨氧化苦参碱调控胃癌细胞增殖及侵袭的分子机制,为胃癌治疗提供新的药物靶点。方法:1.应用原位荧光杂交技术(FISH)检测胃癌组织芯片中lncRNA AK023391的表达,并进行临床病理特征和预后分析。应用qPCR技术检测胃癌细胞系及正常胃粘膜组织中lncRNA AK023391的表达水平。2.通过慢病毒shRNA干扰AK023391在胃癌细胞系中的表达,并通过细胞增殖、迁移、侵袭等体外实验及裸鼠成瘤体内实验验证AK023391对胃癌细胞生物学功能的影响。3.应用全基因组表达谱芯片检测干扰lncRNA AK023391表达后,差异基因的表达,并使用KEGG通路分析富集基因,推断其下游靶基因,并使用Western blot技术进行验证。4.过表达AK023391后,设立不同组别,进行MTT、Transwell、Western blot实验检测氧化苦参碱对胃癌细胞的增殖和侵袭作用。研究结果:1.通过FISH检测,我们统计77例胃癌患者组织芯片发现lncRNA AK023391在45例胃癌患者的癌组织中的表达明显高于癌旁组织,同时,其在胃癌细胞系中的表达高于正常胃粘膜组织(P<0.05)。且多变量Cox回归模型表明AK023391的表达水平可作为胃癌患者生存的独立预后因素。2.干扰lncRNA AK023391的表达后(sh-AK023391),在体外,CCK-8及克隆形成实验发现其可抑制胃癌细胞的增殖,Transwell实验证明sh-AK023391可降低胃癌细胞的侵袭能力,划痕实验表明sh-AK023391具有降低胃癌细胞迁移能力。同时,体内裸鼠成瘤实验结果表明,sh-AK023391可抑制肿瘤的生长。3.干扰AK023391表达后,全基因组表达谱芯片检测差异基因表达,发现共有394条基因明显上调,676条基因明显下调。使用KEGG通路分析富集,PI3K/AKT信号通路明显富集,推断该通路可能为lncRNA AK023391作用的途径,并在Western blot上得到验证。4.氧化苦参碱能抑制lncRNA AK023391的表达水平,在lncRNA过表达后,予以氧化苦参碱处理,AK023391抑制胃癌细胞增殖及侵袭的能力被削弱,推断氧化苦参碱抑制胃癌增殖和侵袭的作用可能与下调lncRNA AK023391的表达水平有关。结论:LncRNA AK023391在胃癌组织和胃癌细胞系中高表达,可作为胃癌患者独立预后因素,且其具有促进胃癌细胞增殖和侵袭的作用。LncRNA AK023391主要通过PI3K/AKT通路调控胃癌细胞的生物学行为。氧化苦参碱的抗胃癌机制可能与下调lncRNA AK023391表达,抑制lncRNA AK023391调控的PI3K/AKT通路相关,该研究为胃癌的治疗和药物筛选提供了有价值的重要靶点。