食源性病原菌生物被膜检测方法的研究

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本文选用常见的食源性病原菌(沙门氏菌,金黄色葡萄球菌)为研究对象,采用合适的定量和定性分析方法对1-7 d的生物被膜的形成及其结构特点进行了分析;在棉花擦拭法的基础上,提出了一种新的用于实验室检测生物被膜的方法——超声波平板法;最后初步研究了生物被膜的快速检测方法。 通过测定1-7 d的沙门氏菌和金黄色葡萄球菌生物被膜中的活菌数,发现沙门氏菌与金黄色葡萄球菌生物被膜中活菌数变化趋势不一致,前者在1-4 d中,活菌数呈上升趋势,从第2 d开始活菌数才达到10~6 cfu/cm~2以上,而后者活菌数无显著变化,第1 d活菌数达到10~6 cfu/cm~2以上。同时用银染法和扫描电镜法对生物被膜进行了定性分析。 用棉花擦拭法和超声波平板法测定1-7 d的沙门氏菌和金黄色葡萄球菌生物被膜中的活菌数,发现超声波平板法测得的活菌数量均高于棉花擦拭法,用SPSS软件对结果进行分析,发现对沙门氏菌生物被膜,两种方法间相关值γ为0.966,对金黄色葡萄球菌生物被膜,两种方法间相关值γ为0.948。 对1-7 d形成的沙门氏菌和金黄色葡萄球菌生物被膜均用超声波作用2,4,6,8,10,12,14 min,与棉花擦拭法进行对照,发现沙门氏菌生物被膜,超声波作用8 min时,与棉花擦拭法间的相关性非常显著,相关系数γ值为0.905。金黄色葡萄球菌生物被膜,超声波作用10 min时,与棉花擦拭法间的相关性非常显著,相关系数γ值为0.93。 对荧光素二乙酸酯(FDA)法检测生物被膜进行了研究,试验结果表明在490nm处,生物被膜溶液的吸光值与菌浓度间有较好得相关性,相关系数R~2为0.9511。
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