荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤基因异常及其临床意义

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目的应用荧光原位杂交(FISH,fluorescence in situ hybridization)技术检测多发性骨髓瘤(MM,multiple myeloma)常见基因异常,并分析其临床意义。方法采用1q21/RB1、D13S319/p53、IGH三组序列特异性基因探针,应用FISH技术对按照WHO诊断标准确诊的44例初诊MM患者进行FISH基因异常检测,并对10例正常对照者骨髓建立各探针检测阈值,检测结果大于阈值为阳性,小于阈值为阴性。并与常规细胞遗传学技术(G显带)检测结果对比,分析常见染色体异常的临床意义。结果(1)FISH技术检测44例初诊MM患者中32例检出基因异常(占72.7%),其中1q21扩增11例(占25.0%),RB1缺失17例(占38.6%),D13S319缺失16例(占36.4%),p53缺失6例(占13.6%),IGH基因重排19例(占43.2%)。检出1种异常者10例(占22.7%),同时有2种异常者11例(占25.0%),3种异常者8例(18.2%),4种异常者3例(占6.8%)。(2) 44例应用常规G显带检测16例无分裂相,28例有分裂相中检出正常核型26例(占92.86%),异常核型2例(占7.14%),均为超二倍体,1例仅为染色体数量异常,1例伴结构异常1q21。FISH技术基因异常检出率明显高于常规G显带技术,差异有显著性(p<0.05)。(3)基因异常与临床参数比较结果显示,血红蛋白、血Ca、LDH与基因异常相关性无统计学意义(P>0.05)。β2-MG与IGH基因重排成正相关(P<0.05),而与1q21、RB1、D13S319、p53基因异常相关性无统计学意义(P>0.05)。骨髓浆细胞数与D13S319缺失成正相关(P<0.05),而与1q21、RB1、p53、IGH异常相关性无统计学意义(P>0.05)。CRE与P53缺失及IGH基因重排成正相关(P<0.05),而与1q21、RB1、D13S319基因异常相关性无统计学意义(P>0.05)。CRP与P53缺失成正相关(P<0.05),与1q21、RB1、D13S319及IGH基因异常相关性无统计学意义(P>0.05)。(4)按年龄<50岁、50-70岁、>70岁分组,基因异常检出分别为2例(50.0%)、26例(74.3%)、4例(80%)。应用统计学分析,三组年龄段基因异常结果经卡方检验差异无显著性(P>0.05)。(5)基因异常与MM分型、分期之间无明显相关性(P>0.05),但基因异常以Ⅲ期和IgG型较多见。结论MM的细胞遗传学异常多为复杂核型,多同时累及数目与结构异常。对于MM患者,常规G显带染色体分析技术不能明确的复杂核型,应用FISH技术可以增加染色体核型鉴定的准确性,同时还能够发现常规细胞遗传学技术不能检出的有重要意义的基因位点的微缺失或重排。本研究中MM最常见的基因异常是IGH基因重排以及RB1和D13S319缺失,其次是1q21扩增,P53缺失最少。但因病例数较少,且患者进行正规治疗者较少,未能进行有意义的治疗方案与细胞遗传学改变及生存时间的比较,需进一步扩大样本量进行研究。FISH可检测出与预后密切相关的累及基因位点的微缺失,异常克隆检出率较常规细胞遗传学技术显著提高(P<0.05),应将FISH作为MM患者的常规检查,评估预后,指导临床治疗。
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