HCV感染者外周血单个核细胞IFNAR2 mRNA的表达

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目的 干扰素(IFN)是目前用于慢性丙型肝炎抗病毒治疗的首选药物,能抑制病毒复制,降低血清ALT水平,减轻肝组织炎症及纤维化程度。但干扰素治疗慢性丙型肝炎的有效率仅为30~50%,停药后半数复发。影响干扰素疗效的因素很多,包括病毒的基因型、治疗前的病毒含量、宿主肝组织病理学改变等,但仅通过这些因素还不能完全预测干扰素疗效。干扰素分子本身并不具备抗病毒功能,必须与细胞表面相应受体相结合,并经过一系列细胞内信号传导,最终产生抗病毒蛋白而发挥作用,与特异性受体相结合是干扰素发挥抗病毒作用的第一步。所以,有学者推测干扰素受体的数量,也是影响其疗效重要因素。已有报道HCV感染者肝组织内有Ⅰ型干扰素受体的表达,且干扰素受体IFNAR1(IFNα receptor)和/或IFNAR2(IFNα/β receptor)mRNA的表达与干扰素疗效相关,并认为干扰素受体表达在干扰素治疗应答组显著高于非应答组。同时,慢性丙型肝炎患者肝组织与外周血单个核细胞(PBMCs)中IFNAR2 mRNA的表达情况呈正相关。本研究中,我们用RT-PCR方法检测不同HCV感染者PBMCs中IFNAR2 mRNA的表达,分析IFNAR2 mRNA表达与患者临床表现的关系,为进一步研究能否用PBMCs中IFNAR2 mRNA的表达情况预测干扰素疗效提供依据。 方法 58例HCV感染者根据感染时间、肝功、肝脏影象学检查的结果分为急性肝炎组4例,慢性肝炎组46例,肝硬化组8例,另设15名无肝炎病毒感染的健康志愿者为对照组。所有实验组病例和对照组均采取4毫升静脉血,肝素抗凝,密度梯度离心法分离PBMCs。Trizol Reagent提取总RNA,RT-PCR法扩增IFNAR2 mRNA及G3PDH mRNA(内参照),PCR扩增产物置于2%琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察电泳结果,并将结果置于凝胶成像分析系统上分析。计算所得的IFNAR2 mRNA光强度值与各自内参光强度值的比值,来反应其IFNARZ mRNA表达水平。PBMCs总RNA同时进行HCR一RNA的检测,检测结果以“+”、“一”表示。结果 全部58例HCV感染者和巧例无肝炎病毒感染的对照组均有G3PDHmRNA表达,证实RT一PCR扩增无误。58例HCV感染者中PBMcs IFNARZmRNA阳性者51例(87 .9%),15例对照组PBMCs IFNARZ mRNA阳性者5例(33 .3%),HCV感染组阳性率显著高于健康对照组。在46例慢性肝炎患者中PBMCs IFNARZ mRNA阳性者43例(93 .5%),检测值为0.7465土0.2982;8例肝硬化患者中PBMcs IFN川双mRNA阳性者4例(50%),慢性肝炎病例组表达显著高于肝硬化组。IFNARZ mRNA表达值在PBMCsHCV一RNA“+”及“一”组间无显著性差异,表达值与血清HCV.RNA载量和HCV基因型无关。结论 HCV感染者,PBMCs IFNARZ mRNA表达显著高于健康对照者,证实HCV感染能够上调PBMCs IFNARZ mRNA的表达。PBMCs IFNARZ mRNA表达在慢性肝炎病例组显著高于肝硬化组,提示IFNARZ mRNA表达的变化情况可能与肝脏纤维化的有无及进展程度相关。PBMCs IFNARZ mRNA的表达与血清病毒载量、病毒基因型及PBMCs HCV.RNA无关。
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