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目的探讨EZRIN SiRNA修饰人卵巢癌细胞后对人卵巢癌细胞体外侵袭能力变化的影响,从而为卵巢癌的基因治疗应用于临床提供实验依据。方法1. PGPU6/GFP/Neo-siRNA–EZRIN表达载体的构建。2.人卵巢癌HO-8910细胞体外培养:卵巢癌HO-8910细胞株在37摄氏度、5%浓度CO2以及饱和湿度的恒温密、闭培养箱条件下,培养在RPMI 1640培养基中。用PBS缓冲液冲洗、0.25%胰酶消化并传代。3.将EZRIN SiRNA及阴性对照SiRNA以LipofectamineTM2000转染入人卵巢癌HO-8910细胞,用RT-PCR和Western blot方法分别检测EZRIN基因和蛋白水平表达量的改变,验证所设计的siRNA的抑制效应。4.体外侵袭实验:验证EZRIN SiRNA转染人卵巢癌HO-8910细胞后对其体外侵袭能力的影响。结果1. PGPU6/GFP/Neo-siRNA–EZRIN通过脂质体转染人卵巢癌HO-8910细胞18小时后细胞开始出现绿色荧光,36小时后转染率达60%以上。2.构建的PGPU6/GFP/Neo-siRNA-EZRIN通过脂质体转染到人卵巢癌HO-8910细胞,能明显抑制人卵巢癌HO-8910细胞EZRIN基因和蛋白的表达。3.体外侵袭实验显示,转染EZRIN SiRNA组,穿膜细胞数为(46.7±3.1)个,分别与空质粒组[(91.2±1.3个]及空白对照组(91.4±1.3)个]比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论1. PGPU6/GFP/Neo-siRNA-EZRIN表达载体成功转染人卵巢癌HO-8910细胞。2. EZRIN SiRNA修饰人卵巢癌HO-8910细胞后,可明显抑制人卵巢癌HO-8910细胞体外侵袭能力。