肝动脉化疗栓塞联合外周静脉应用重组人血管内皮抑制素治疗肝癌的实验研究

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目的研究肝动脉化疗栓塞联合外周静脉应用重组人血管内皮抑制素治疗兔VX2肝癌的安全性及有效性。材料与方法1.模型制作超声引导下经皮穿刺瘤块推送法建立兔VX2肝癌模型。接种后第20天行PET/CT检查,选取肝内病灶为单发,直径在1-2cm之间,无肝外转移的荷瘤兔作为研究对象。同日行超声检查,测量肿瘤最大直径及最小直径,计算干预前体积。2.实验分组实验共分3组:单纯TACE组(G1)、联合治疗组(G2)、对照组(G3)。G1组和G2组于接种后第21天行TACE,术后每天耳缘静脉推注生理盐水(G1组)或重组人血管内皮抑制素(G2组),连续7天;G3组于接种后第21天行肝动脉造影,术后处理同G1组。每组20只动物参加实验。3.观察指标①血常规及肝功能:接种后第21天和28天分别采集动物外周血,行血常规及肝功能检查,比较干预前后WBC及ALT的变化。②肿瘤体积:接种后第20天和第28天测量肿瘤最大直径和最小直径(超声),计算肿瘤体积,比较各组干预后体积/干预前体积(V2/V1)的差异。③肿瘤转移率:接种后第28天再次行PET/CT检查,统计各组发生转移的动物只数,计算转移率,比较各组转移率的差异。④肿瘤微血管密度:接种后第28天完成上述指标观察后处死所有动物,行免疫组化检查(抗CD34染色),按Weidner推荐的方法计算肿瘤微血管密度(MVD),比较各组MVD的差异。结果1.动物生存情况干预后动物早期死亡(7天之内),G1组6只,G2组5只,G3组2只。各组完成实验的动物只数:G1=14,G2=15,G3=18。2.血常规及肝功能各组干预前后WBC计数差异无显著性。单纯TACE组(G1)和联合治疗组(G2)干预后ALT高于干预前水平(P <0.01),对照组(G3)干预前后ALT差异无显著性。干预前各组ALT差异无显著性,干预后各组ALT差异有显著性(F=7.068, P =0.002),其中单纯TACE组(G1)和联合治疗组(G2)较对照组(G3)升高,但G1与G2间的差异无显著性。3.肿瘤生长情况各组平均V2/V1分别为:G1=1.216±0.304,G2=1.211±0.314,G3=4.723±1.562。差异有显著性(F=68.312 P=0.000),其中单纯TACE组(G1)和联合治疗组(G2)较对照组(G3)降低,但G1与G2间的差异无显著性。4.肿瘤转移情况接种后第28天经PET/CT检查,各组转移率分别为:G1=78.57%(11/14), G2=33.33%(5/15), G3=77.78%(14/18)。差异有显著性(χ2=8.877,P=0.012),其中联合治疗组(G2)低于单纯TACE组(G1)(P=0.014)和对照组(G3)(P=0.010),但G1与G3间的差异无显著性。转移最常见的部位是肝(26例次),淋巴结(21例次),肺(10例次)、骨(3例次)。5.肿瘤血管生成各组肿瘤MVD(抗CD34染色,200×视野)分别为:G1=75.2±11.0,G2=21.7±10.1,G3=61.3±12.3。差异有显著性(F=89.874 P=0.000),并且两两比较差异皆有显著性(P<0.01)。结论TACE联合外周静脉应用重组人血管内皮抑制素治疗兔VX2肝癌对肝功能的损伤不重于单纯TACE;对肿瘤生长的抑制不优于单纯TACE,但可明显抑制血管生成,对肿瘤转移的抑制优于单纯TACE。
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