吸入七氟烷对衰老模型大鼠认知功能及海马胆碱能系统影响的研究

来源 :遵义医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zhouyueying
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:(1)通过Morris水迷宫及平衡杆实验检测衰老模型大鼠吸入3.2%七氟烷麻醉苏醒后2h、1w、4w学习、记忆能力,(2)通过RT-qPCR及Western blot方法检测大鼠海马α7nAChR、ChAT及AChE mRNA相对表达量及蛋白含量,探讨衰老大鼠模型吸入七氟烷麻醉苏醒后2h、1w、4w认知功能改变与中枢胆碱能系统间的关系及机制。方法:成年健康雄性SD大鼠共72只,连续6周头颈部皮下注射D-半乳糖,建立衰老模型大鼠。将模型大鼠随机分为四组:(1)对照组(Con组,n=18)予以运载气体(2L/min Air+2L/min O2)6h;(2)七氟烷组(Sev组,n=18)予以体积分数为3.2%七氟烷+运载气体6h;(3)七氟烷+α7nAChR拮抗剂组(Sev+M组,n=18):注射拮抗剂24h后,处理同Sev组;(4)七氟烷+α7nAChR激动剂组(Sev+P组,n=18):注射激动剂24h后,处理同Sev组。各组大鼠于七氟烷吸入麻醉处理前,采用Morris水迷宫定位航行实验进行为期5d的基线学习记忆能力测试,统计并分析每日逃避潜伏期数据,以此观察各组大鼠吸入七氟烷前认知功能是否具有差异。七氟烷吸入麻醉结束后,四组大鼠按照取材时间各自分为麻醉苏醒后2h(麻醉恢复急性期)、1w(麻醉恢复中远期)、4w(麻醉恢复远期)三个亚组,利用Morris水迷宫工作记忆实验检测大鼠即时新学习能力,利用空间探索实验检测大鼠回忆探究能力;利用平衡杆实验检测大鼠过杆始动能力及短期记忆能力。按照各时间点行为学测试结束后,对应时间点6只大鼠进行海马组织取材,采用RT-qPCR法检测大鼠各时间点右海马α7nAChR、ChAT、AChE的mRNA相对表达量,采用Western blot法检测大鼠各时间点左海马α7nAChR、ChAT、AChE蛋白相对表达量。结果:1、Morris水迷宫实验结果:(1)适应性训练:各组大鼠均具备正常游泳能力,无先天愚型大鼠。(2)基线定位航行实验:各组大鼠逃避潜伏期呈缩短趋势,其中第2天与第1天比较逃避潜伏期数据明显缩短,后3天测试中各组大鼠逃避潜伏期与第1、2天比较均明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。后3天测试中组内及组间比较无明显差异(P>0.05)。表明大鼠已经形成对逃逸平台稳定记忆,且各组大鼠学习记忆能力基线一致。(3)麻醉苏醒后工作记忆检测:苏醒后2h,Sev组、Sev+M组及Sev+P大鼠工作记忆潜伏期较Con组明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组大鼠工作记忆潜伏期与Sev组及Sev+M组相比较明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。苏醒后1w,Sev组、Sev+M组大鼠工作记忆潜伏期较Con组明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组大鼠与Sev组及Sev+M组比较明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。苏醒后4w,各组大鼠工作记忆潜伏期无明显差异(P>0.05)。(4)麻醉苏醒后空间探索实验:苏醒后2h,Sev组大鼠平台穿越次数、有效区域穿越次数、平台象限穿越次数较Con组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+M组平台穿越次数、有效区域穿越次数较Con组明显减少,平台象限穿越次数百分比较其余各组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组大鼠平台穿越次数、有效区域穿越次数较Sev组及Sev+M组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。苏醒后1w,Sev组大鼠平台象限穿越次数较Con组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),其余各项指标与其余各组间比较均无明显差异(P>0.05)。Sev+M组大鼠各项指标与Con组及Sev组比较均无明显差异(P>0.05)。Sev+P组大鼠有效区域穿越次数及平台象限穿越次数与Sev+M组比较明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。苏醒后4w,各组间各项指标比较均无明显差异(P>0.05)。2、平衡杆实验结果:(1)适应性训练:各组大鼠经过适应性训练均能在规定时间内通过平衡杆。(2)麻醉苏醒后平衡杆实验:苏醒后2h,Sev组及Sev+M组大鼠平衡杆过杆始动时间较Con组及Sev+P组大鼠明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。苏醒后1w,Sev组大鼠过杆始动时间较Con组大鼠缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+M组大鼠过杆始动时间较其余各组延长,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组大鼠过杆始动时间与Con组及Sev组比较无明显差异(P>0.05)。苏醒后4w,Sev组大鼠过杆始动时间与Con组及Sev+P组比较无明显差异(P>0.05)。Sev+M组大鼠过杆始动时间与其余各组比较均延长,差异有统计学意义(P<0.05)。3、RT-qPCR检测mRNA组间比较结果:(1)苏醒后2h,Sev组大鼠海马内α7nAChR、ChAT、AChE mRNA表达量均较Con组表达量下调,比较差异具备统计学意义(P<0.05);Sev+M组大鼠海马内α7nAChR、ChAT mRNA表达量较Sev组大鼠下调,AChE mRNA表达较Sev组上调,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组大鼠海马内α7nAchR、ChAT mRNA表达量较Sev组及Sev+M组大鼠上调,AChE mRNA表达量较Sev+M组大鼠下调,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)苏醒后1w,Sev组大鼠海马内α7nAChR、ChAT mRNA表达量较Con组大鼠下调,AChE mRNA表达量较Con组大鼠上调,差异有统计学意义(P<0.05);Sev+M组大鼠海马内α7nAChR、ChAT、AChE mRNA表达量较Sev组大鼠均下调;Sev+P组大鼠海马内α7nAChR mRNA表达量较Sev组及Sev+M组大鼠上调,而海马内ChAT mRNA表达量较Sev组大鼠下调,较Sev+M组上调,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组AChE mRNA表达量较Sev组下调,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)苏醒后4w,Sev组大鼠海马内α7nAChR、ChAT、AChE mRNA表达量较Con组均上调,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+M组大鼠海马AChE mRNA表达量较Sev组大鼠下调,但α7nAChR、ChAT mRNA表达量较Sev+P组均上调,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组大鼠海马内α7nAChR、ChAT、AChE mRNA表达量较Sev组大鼠下调,差异有统计学意义(P<0.05)。4、Western Blot检测蛋白表达组间比较:(1)苏醒后2h,Sev组大鼠海马内α7nAchR、ChAT、AChE蛋白含量较Con组大鼠下调,差异有统计学意义(P<0.05)。Sev+P组大鼠海马内α7nAChR蛋白含量较Sev组及Sev+M组大鼠上调,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)苏醒后1w,Sev组大鼠海马α7nAChR、ChAT、AChE蛋白含量较Con组无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。Sev+M组大鼠海马内α7nAChR蛋白含量较Sev组及Sev+P组大鼠下调,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)苏醒后4w,各组大鼠海马内α7nAChR、ChAT、AChE蛋白含量均无明显上调或下调,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1、衰老模型大鼠吸入3.2%七氟烷,苏醒后恢复急性期出现认知功能障碍并延续至中远期。2、衰老模型大鼠吸入3.2%七氟烷,苏醒后恢复急性期可以引起海马ChAT、AChE、α7nAChR mRNA及蛋白代谢紊乱。3、α7nAChR特异性激动剂PNU可以上调大鼠海马内α7nAChR mRNA及蛋白表达,改善短期内认知功能障碍。
其他文献
BTG4是BTG/Tob家族中最后一个被克隆的成员,关于其的研究很少。研究表明BTG4在小鼠母体-合子过渡时期中对母体mRNAs的降解起着关键作用,而且在胃癌等肿瘤中表达下调。然而关于BTG4的调控机制及其在肿瘤中的作用至今尚不明确。本文鉴定了BTG4的启动子区域,并进一步研究p53对BTG4的调控作用,并揭示了BTG4在肿瘤增殖、迁移以及细胞凋亡中发挥的作用。(1)BTG4启动子区域的鉴定在本文
注意促进效应指的是在分散注意条件下,当被试同时执行记忆任务和探测任务时,与目标探测同时出现的刺激记忆成绩好于与分心拒绝同时出现的刺激记忆成绩。已有研究表明,注意促进效应适用于多种不同类型的记忆任务当中:不仅可以在图片记忆中发现,也可以在词汇记忆中发现;不仅可以在外显记忆中发现,也可以在内隐记忆中发现。但以往关于注意促进效应的研究都是在一语条件下进行的,目前尚未清楚的是,第二语言词汇作为背景刺激,其
错误记忆意味着人们回忆起了从未发生过或与现实不符的事情(Roediger&McDermott,1995),其中一种由语义相关的单词触发,如集中联想范式(DRM范式)。定向遗忘通过“遗忘”指示使被试的记忆内容受损(Anderson,2001),常以项目法和词表法为实验范式。本研究结合错误记忆的DRM范式和定向遗忘的项目法范式,通过两个实验探讨定向遗忘下学习项目的呈现时间和预警指导语对错误记忆
本论文基于前人长期研究成果和认识的基础上,以塔里木河上中游流域作为研究靶区,以荒漠河岸林胡杨为主要研究对象,运用树木年轮研究方法,分析塔里木河上游和中游河岸胡杨径向生长量的特点。选取采样断面附近影响胡杨生长的最敏感的温度和径流因素,利用数学方法分析三者周期以及变化的相关性,研究塔里木河胡杨径向生长随温度和径流动态变化的响应。主要研究成果如下:(1)长期时间段胡杨年轮生长、温度以及径流变化存在着多种
通过上海临港项目,初步研究了临港芦潮港海水温度逐月变化情况、海水源热泵方案的确定和选择、水蓄冷、取回水口与取回水管线敷设、水源水流量的计算、海水源水处理措施、海
建构主义翻译学是由吕俊教授于2006年提出的一个新的翻译理论研究范式,它以返回翻译本体为主旨,实践哲学为哲学基础,广义认识论为认识论基础,交往理性为理性基础,共识性真理为真理观,言语行为理论为语言学基础,为翻译研究提供了新的视角。而翻译活动本质上是一种人与人之间,文化与文化之间的交流活动,具有交往活动的社会性、实践性,因此,建构主义翻译学主张翻译不仅应遵从语言的构成规律,还必须遵从语言的交往性原则
近年来,随着能源需求增加和环保压力增大,新能源发电装机占比不断增大。新能源的不可控性,传统火电装机占比及发电小时数的逐年下降,这与目前电力系统的调峰等辅助服务主要依靠火电机组的现实形成鲜明对比,使得网、源、荷的协调面临巨大挑战。与此同时,供热机组的调峰能力受到一定程度的制约,严重影响了这些地区的新能源消纳,存在不同程度的弃风、弃光。因此,供暖季,在满足供热负荷的基础上,挖掘热电厂最小出力空间,对消
海洋含卤天然产物作为海洋生物的次级代谢产物,其新颖复杂的化学结构赋予了它们独特的生物活性,其中对肿瘤、神经和心脑血管疾病方面的特殊效应值得我们深入研究。我们课题组长期致力于复杂含卤海洋天然产物的全合成研究,目前我们组已经完成了 Aplydactone、(+)-Majusculoic Acid的全合成研究。本篇论文主要介绍了我们针对留体类海洋含卤天然产物Clionastatin B的合成研究。Cli
研究渗流场的变化情况对于确保河底隧道安全施工与正常服役至关重要。河底隧道渗流场包括进水边界、出水边界与场内区域等关键要素。在众多因素的共同作用下,河底隧道渗流场的变化情况比较复杂,相关的研究还需要深入和完善。本文针对矿山法河底浅埋小净距公路隧道这类新型隧道,研究隧道渗流场的进出水边界性状与场内分布特征,并提出相关的工程建议。主要研究内容与成果如下:(1)河底隧道上方的河水位变化性状是决定渗流场进水
版画作为印刷传播媒介的出现,随时代变化及社会的发展,版画被赋予的意义与价值在不断更新转化。在当今科技、信息发达高速运转的时代,信息化充斥着我们的生活,作者在接受与被接受的关系中试图发现寻找“图像信息”重构与版画对自身创作的影响。本文从视觉图像角度出发,尝试从图像本身及观看的方式逐步引入到铜版画的创作思维中,在版画创作中对图像信息重构的探索与延伸作为思考的问题,进行分析、研究、思考与实践。通过对版画