基于DNA纳米结构支架的高效基因修复体系

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人体中DNA受外部环境影响如环境因素以及紫外线照射的影响,以及内部致癌物的侵蚀而受损,基因由于其在转录时也发生着碱基错配、丢失等情况,导致基因本身也发生着变化。基因被复制时有可能会出现碱基错配的情况,而人类的遗传物质之所以相对稳定的存在,这是因为人体中有能监控并修复的酶系统在发挥作用。基因修复是指在原位修复有缺陷的基因,将靶细胞中的致病基因加以修正,确保人体中遗传物质的稳定性,维护着人类正常的生命健康。  基因损伤是指由于碱基缺失或者错配以及外界环境因素如紫外线照射等原因导致的基因突变。  DNA是纳米器件和纳米结构有吸引力的聚合物建筑材料,因为它具有自我识别和自组装的能力。装配的形成依赖于碱基互补配对的基本原则,对序列的精心设计可以使得装配的DNA纳米结构具有形状自主设计、刚性良好等性能。依据碱基互补配对原则,DNA双螺旋结构表现出非常高的稳定性,由此可进一步设计形成基于DNA高阶结构的DNA折纸结构以及DNA支架等众多DNA笼。DNA链之间或之中可能有许多非经典的配对模式,这些相互作用导致形成不寻常的结构,包括但不限于G-四联体,i-基序,三链体和平行链双链体。这些结构创造了更多样化的基于DNA的构建模块,并且具有超越传统双链DNA的某些优势。  各种外部因素以及内部因素的影响将导致人体基因损伤,如不及时防御,将进一步恶化成癌变等疾病。DNA修复系统是对DNA损伤进行修复的重要手段。其中,碱基切除修复是修复中重要的手段,本研究针对两种酶的协同作用进行展开,当人体由于外部因素或内部因素影响时,可能导致基因中碱基的突变即G∶C到T∶A颠换,8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶具有特异性识别基因组中的8-oxoG,在基因的碱基切除修复中发挥着重要作用。切除后产生ap位点,通过APE1酶将ap位点切除,在阻止细胞的恶变中起重要作用。  本研究采用基于DNA纳米支架结构的方法,通过精准设计支架的结构,取向,将HOGG1酶与APE1酶连接在支架上,构架支架-酶基因修复体系。运用荧光曲线对酶活性进行检测,通过设计支架结构可起到固定化酶以及精准控制酶间距离的作用,进而提高酶活性,提升基因修复的效率。  通过基于DNA纳米支架结构的酶级联体系的建立是本次课题的研究重心,旨在通过该方法的建立实现对基因修复效率提高。DNA本身作为生物分子,其纳米支架结构具有很好的生物相容性,这对于今后从体外实验到体内实验打下了非常好的物质基础。研究在基于DNA纳米支架的酶级联体系中酶的活性与效率,这对于基因损伤的修复以及对癌症的前提防御预发挥了辅助的作用。
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