尺寸均一的多功能纳米粒在恶性黑素瘤成像和治疗中的应用

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目的:通过手动过膜挤压乳化法制备尺寸均一的多功能聚乳酸纳米粒子(PTX-PLA-QDs-MNPs),并研究了人黑素瘤A875细胞对纳米粒子的吞噬行为、纳米粒子对细胞的毒性及其在MRI成像中的应用。方法::1、应用手动过膜挤压乳化法制备粒径均一、可调的生物降解多功能纳米粒子PTX-PLA-QDs-MNPs,用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)对粒子进行形貌表征,用动态光散射(DLS)对粒径及其分布进行表征,用TEM和凝胶色谱(HPLC)对其包封率(EE%)和载药量(DL%)进行检测,用HPLC和透析法研究药物体外释放行为。2、用荧光显微镜检测不同时间段A875细胞系摄入纳米粒的情况,用CCK-8试剂盒进行细胞毒性分析,用磁共振检测仪进行纳米粒和其在细胞MRI的成像研究。该方法同样适用于聚己内酯(PCL)和聚乳酸-乙醇酸(PLGA)多功能纳米粒子的制备。结果:1、通过过膜挤压乳化这种简便易行的方法,可以获得尺寸均一、粒径分布窄、具有很好生物相容性的多能功能聚合物纳米粒;2、荧光显微镜观察细胞吞噬研究表明,与对照组(空白对照PBS和对照PLA-NPs)相比,PTX-PLA-QDs-MNPs在细胞培养10min后细胞质中就可以看到微弱的红色荧光,表明纳米粒子已进入胞质内,6h后则可以看到细胞质及细胞核中有非常强烈的荧光;3、与裸药PTX及纳米粒子PTX-PLA-QDs相比,PTX-PLA-QDs-MNPs具有更明显的细胞毒性,而PTX-PLA-QDs比裸药PTX具有更显著的细胞毒性;4、随着铁元素(Fe)浓度的升高,样品的MRI成像及细胞吞噬MRI成像呈现明显的信号强度逐渐减弱。采用PCL和PLGA制备得到的多功能纳米粒子具有类似的实验结果。结论:通过该简便方法获得的载有PTX的纳米粒子具有多功能性,在载药、生物成像、肿瘤治疗(例如恶性黑素瘤MM的治疗)方面有较大的应用前景。
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